猪轮状病毒jl4株vp4基因克隆及其主要抗原位点的原核表达.pdfVIP

摘 要 猪轮状病毒(PorcineRotavirus，pRv)属于呼肠病毒科轮状病毒属，是引起仔猪病毒性 腹泻的主要病原之一，该病在世界范围内分布，给世界各地的畜牧业造成严重的损失。 本研究根据GenBank中已发表的猪轮状病毒VP4全基因序列，设计合成一对引物， 将其与pMDI 血清型，而同Gotffried株属于不同血清型。 研究资料表明PRV VP4基因5’端长750bp的特异性片段主要决定其活性，据此又设 N端)，命名为VP4主要抗原位点基因；该主要抗原位点基因与PRV国外分离株CRW-8 守，不同型间差别较大，其中aa81，aa207变异最大。 BL21 度扫描定量分析，融合蛋白占菌体总蛋白的26．6％。对表达的蛋白进行Westernblot分析 和谷胱甘肽琼脂糖亲和层析纯化．得到纯化的VP4融合蛋白。Westernblot证实所表达 的融合蛋白有较好的反应原性。 因的表达，为研究我国轮状病毒的病毒毒力的相关基因位点、抗原变异、VP4蛋白的致 病机理研究及基因工程疫苗的研制提供依据。