桑黄醇提物对MCF7乳腺癌细胞活力和周期改变的影响.pdfVIP

食用菌学报@2015．22(2)：46--50 DOI：10．16488／j．cnki．1005—9873．2015．02．009 桑黄醇提物对 MCF7乳腺癌细胞活力和周期改变的影响 汪雯翰 ，樊 华 ，张劲松 ，杨 焱 ，赵香丽 ，张 凯 ，吴 迪 ，颜梦秋 ，贾 薇 (上海市农业科学院食用菌研究所 ，农业部南方食用菌资源利用重点实验室，国家食用菌工程技术研究中心 国家食用菌加工技术研发分 中心，上海市农业遗传育种重点开放实验室，上海 201403； 德国柏林大学和洪堡大学夏洛特医学院实验医学、临床医学和病理生物化学研究所 ，柏林 13353) 摘 要 ：为评价桑黄 (Phellinusbaumii)子实体醇提物对 MCF7乳腺癌细胞 的影响，用不同浓度醇提物作用于 MCF7细胞 ，用 Alamarblue法测定细胞增殖率 ，显微观察细胞形态变化 ，用流式细胞术 PI染色法和 DCF染 色法分别检测细胞周期变化和 ROS释放量 。结果表明：桑黄子实体醇提物使 MCF7细胞形态发生 明显变化 ， 对 MCF7细胞增殖有显著的抑制作用 ，能引起 MCF7凋亡细胞数量升高 、降低 s和G2／M 细胞数量 ，并呈现浓 度梯度依赖性 ，但 ROS实验结果提示桑黄子实体醇提物的促肿瘤细胞凋亡与 R0S释放无关。 关键词 ：桑黄 ；醇提物 ；MCF7；细胞凋亡 乳腺癌是发生在乳腺腺上皮组织 的恶性肿 从 桑黄 中筛选 出抗乳腺癌活性 的有效成分提供 瘤 ，与其他大多数 国家一样 ，乳腺癌 已成为 了中 参考 。 国女性最常见的癌症 ，在上海等东部沿海城市 ， 1 材料与方法 乳腺癌 已超越肺癌成为女性发病率最高的癌症 ； 目前每年 中国乳腺癌新发数量和死亡数量分别 1．1材料 占全世界的 12．2％ 和 9．6％。临床上用于治疗 桑黄 (P．baumii)菌株 (编号 ：3249)由上海 乳腺癌的常规药物虽然对治疗起到重要作用，但 市农业科学 院食用菌研 究所提供 ，于 2010年 由 却存在着明显的毒副作用 。经大量实践证明，运 上海市农业科学 院食用菌研究所栽培获得子实 用现代提取分离纯化技术 ，从天然产物中获得的 体 ，菌种保存于中国微生物菌种保藏 中心上海食 天然活性物质 ，如三萜 、生物碱、多糖和皂苷等活 用菌分中心，标本存放于上海市农业科学院食用 性成分能治疗乳腺癌，同时减轻放化疗 的毒副 菌研究所加工技术与发酵工程研究室 。 作用 一。 人乳腺癌细胞 MCF7和 中国仓 鼠正常卵巢 桑黄 (Phellinusbaumii)是一 类珍贵 的多年 细胞 CHO 均 来 自美 国 菌 种 保 藏 中 心 生大型药用真菌 ，在我 国传 统 中医药 中用于治 (Manassas，USA)。 疗痢疾 、盗汗、血崩、血淋 、脐腹涩痛 、脱肛泻血 、 1．2试剂与仪器 带下 、闭经 。现代药理学研究表 明，桑黄对小 鼠 试剂 ：有色 a．MEM 培养基、无色 a—MEM 培 肉瘤 s。。、腹水瘤 、胃癌等多种癌症 的生长均具 养基和胎牛血清购 自Gibco公司；Ethylenedia． 有抑制作用 ，被认为是 目前 国际公认 的抗癌效 minetetraaceticacid(EDTA)购 自CarlRoth公 果较好的大型真菌之一l5]。虽然 已有关于桑黄 司 ；RibonucleaseA(RNaseA)购 自Fermentas 对乳腺癌抑制作用 的研究 [6]，但 对有效成分 的 公 司 ；2’，7’．Dichlorofluorescein diacetate 作用机制研究还较少 ，因此笔者测 定 了桑黄子 (DCF-DA)和 Propidium iodide(PI)购 白Sig