熊果酸对肺癌细胞株A549及SPCAl细胞周期的抑制作用.pdfVIP

· 论 善 · JMedRes，May2015，Vo1．44No．5 熊果酸对肺癌细胞株 A549及 SPCA1细胞 周期的抑制作用 付 伦 朱 敏 李招云 王 攀 朱 杰 卢德赵 摘 要 目的 研究熊果酸(ursolicacid，uA)对肺癌细胞株 A549及 SPCA1细胞周期的抑制作用，探讨其分子机制。方法 采用 MTS法检测不 同浓度 UA作用不同时间对 A549及 SPCA1细胞 的增殖抑制作用 ；光镜下观察细胞形态学变化 ；流式细胞仪 检测不 同浓度 UA对 A549及 SPCA1细胞周期分布的影响；实时荧光定量 PCR分析 uA作用下A549及 SPCA1的相关分子表达 情况。结果 MTS结果显示 uA对 A549及 SPCA1细胞具有增殖抑制作用 ，且呈时间和剂量依赖性 。经 uA作用后 ，光镜下可见 A549及 SPCA1细胞增殖受到抑制 ，细胞出现变圆、回缩和脱落。流式细胞仪结果显示在 uA作用后 ，A549及 SPCA1细胞周期抑 制在 G。／G 期，s期和 G ／M期的比例降低 。实时荧光定量 PCR结果表 明，uA作用后 A549及 SPCA1细胞 cyclinD1mRNA、cy— clinEmRNA、Ankrdl7mRNA表达水平降低 ，p27mRNA、p16mRNA表达增加 ，Ankrd17mRNA表达变化差异无统计学意义 。结论 UA能明显抑制 A549及 SPCA1细胞增殖 ，呈时间和剂量依赖性 ，该作用是通过将细胞周期抑制在 G。／G。期实现 的。其分子机制 可能与上调 p27和 p16的表达 ，下调 cyclinD1和 cyclinE的表达有关。 关键词 熊果酸 A549细胞 SPCA1细胞 细胞周期抑制 中图分类号 R737．9 文献标识码 A DoI 10．11969／j．issn．1673—548X．2015．05．018 EffectsofUrsolicAcidonCellCycleofA549CeilsandSPCA1CellsandItsMechanism． FuLun，ZhuMin，LiZhaoyun，eta1．Schooof MedicalLabScience，SchoolofLifeSciences，WenzhouMedicalUniversity，Zhejiang325035，China Abstract Objective ToexplorethecellcycleinhibitionofursolicacidinthelungcancercelllineA549andandSPCA1andst— ndyitsmechanisms．M ethods TheA549cellsandSPCA1cellsweretreatedwithursolicacidatdifferentconcentrationfordifferentdura· tion．ThecellinhibitionratewasmeasuredbyMTSassay．Themorphology ofA549 cellsandSPCA1ceilswereobservedunderinve~ed microscope．Theflow eytometrywasusedtodetectcellcyclearrest．Theexpressionofcellcyclearrestrelatedgenesweredetectedwithre— al—timepcr．Results UrsolicAcidremarkablyinhibitedtheproliferationofA549cellsandSPCA1cellsandtherewasadoseandtime— dependentmanneramongthem．ThemorphologicalchangesofA549cellsandSPCA1cells，suchasproliferationinhibition，cellretraction， exfoliation andnecrosiswereobviousunderlightmicroscope．ThecellcyclewasblockedatG0／G1phaseandthecellpopulationinSan