16srrna测在螺杆菌感染与肝癌相关性研究中的应用.pdf

中文摘要 16SrRNA检测在螺杆菌感染与肝癌相关性研究中的应用 摘 要 目的采用分子生物学技术，从分子水平上通过检测螺杆菌16SrRNA基因，探讨螺 杆菌感染与原发性肝癌(IICC)之间的相关性，为原发性肝癌病因和发病机制提供新 的思路，同时对原发性肝癌的临床诊断和防治开辟新的途径。 软件包与大肠埃希菌、溶血链球菌和嗜肺巴氏菌的16SrRNA的高保守区序列比较， 优化并设计出一对属特异螺杆菌共用引物、反应参数和一个属特异螺杆菌DNA探针， 分别用于PCR扩增和Southern杂交确认。②选择术后原发性肝癌组织15例为实验 组；胃癌、非原发性肝癌、结直肠癌和子宫肌瘤各15例为对照组。原发性肝癌组和 胃癌组癌组织块一部分制成匀浆提取DNA，用于PCR和Southern实验，另一部分和 其它对照组制作病理切片用于原位杂交实验。③合成Battle设计的肝螺杆菌(Hh)、 异螺杆菌16SrRNA-cDNA共用探针，利用地高辛3’一末端标记法标记探针，检测各 认的原发性肝癌组阳性标本DNA进行序列测定，以验证螺杆菌感染类型。 结果①PCR技术检测15例原发性肝癌患者结果9例螺杆菌16SrRNA基因阳性，并 将阳性标本作Southern杂交，证实为螺杆菌属16Sr