奶牛生殖系统内朊蛋白与朊病垂直传播的组织相关性研究.pdfVIP

中文摘要 上世纪80年代疯牛病在欧洲暴发，对全球经济造成很大的损失，更为严重的是它能通 过食物链传染给人，造成人的新型克雅氏病(nvCJD)。在该类疾病的发生，发展过程中，PrP 作为模板诱导正常分子nP发生构象改变，产生大量具有蛋白酶抗性的PrP并在中枢神经 系统聚集而发病。目前人们发现TSE可以水平传播，但人们对于TSE是否能垂直传播仍未定 论。生殖系统与垂直传播有密切关系，研究生殖系统中细胞型朊蛋白的表达对于探讨TSE 能否通过生殖系统而垂直传播具有重要的意义。研究内容如下： 1．用实时定量RT-PCR对PrP。在生殖系统不同组织中的表达进行检测，我们采用GAPDH基 因做内参照基因的相对荧光定量RT—PCR方法，对目的基因和内参基因分别构建标准重组质 粒，制备标准曲线，利用标准曲线对采集雌雄奶牛生殖系统的12个不同组织PrP基因表达 进行定量。试验结果表明奶牛的雌性生殖系统和雄性生殖系统的各组织均有PrP基因表达， 0．28±0．0007；阴茎呈现低表达，为0．18±0．0017；雌性奶牛的子宫、子宫阜呈现高表达， 的正常表达，为研究疯牛病是否可以通过生殖系统垂直传播的奠定理论基础。 2．用免疫组织化学的方法对奶牛生殖系统中朊蛋白进行定位研究，结果表明：在雌性 奶牛的卵巢