朊病毒病核酸疫免疫原性的基础研究.pdfVIP

摘 要 摘 要 目的(1)构建定位于溶酶体、泛素的PrP表达载体，并进行蛋白表达特点及 定位的鉴定；(2)动物免疫后，初步研究此融合表达载体在小鼠体内激起的细胞免 疫反应和体液免疫反应，得到一组最基础的免疫数据，为以后朊蛋白疫苗的研究 提供基础数据。 方法(1)将泛素基因、溶酶体膜定位信号序列基因和PrP基因连接，克隆 真核表达细胞，经Western Blot和问接免疫荧光技术检测PrP表达特点；(2)小鼠 分八组，其中四组小鼠按0、14、28天分三次分别用质粒pcDNA3．1、 后2周，取脾脏及血液进行ELISPOT、ELISA、WesternBlot检测。 结果(1)构建的各种PrP定位表达载体均可定位表达具有三种类型的糖基化 分子的PrP，以双糖基化分子类型最多。带有泛素、溶酶体信号尾的质粒 提示泛素、溶酶体信号能加速表达的PrP在细胞内的降解。(2)动物免疫后，重 SFCs／106／PBMCs，PrPL PrP+rPrP组巾有一只小鼠为113．5