沙门菌质粒毒力因spvb突变株的构建及其对上皮细胞自噬的影响.pdf

沙门菌质粒毒力基因印诏突变株的构建及其对上皮细胞自噬的影响 中文摘要 中又丰葡芰中文摘要 目的： virulence B，spv曰)突变株， 构建沙门菌质粒毒力基[](Salmonellaplasmid gene 通过上皮细胞感染模型，研究该基因对细胞自噬的影响，为探讨沙门菌质粒毒力 基因spvB致病机制及减毒活疫苗的制备提供理论和实验依据，并为后续利用小鼠 感染模型进一步研究该基因的功能提供工具和手段。 方法： ～．沙门菌质粒毒力基因spvB突变株的构建 Premier 5．0设计PCR特异性引物，以鼠伤寒沙门菌标准株SR．11基因组为模板， 扩增获得spvB基因缺陷性核苷酸片段后连接至自杀质粒PGMBl51。将改建的自 杀载体导入含有spvB基因的鼠伤寒沙门菌SR一11野生株中进行同源重组，用PCR 方法挑选稳定传代的突变株并进行基因测序鉴定。 2．根据spvB基因序列设计引物，以鼠伤寒沙门菌