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缺氧对新生鼠脑细胞凋亡和神经再生的影响 中文摘要 【目的】 模拟新生儿出生窒息，建立新生大鼠缺氧模型，研究缺氧对新生鼠脑神经源 性分化因子（NeuroD）表达以及细胞凋亡和神经再生影响，为新生儿围产期窒息 所致的缺血缺氧性脑病的防治研究提供实验依据。 【方法】 1．将参照Grojean 的方法，新生大鼠短暂置于100%氮气环境中，建立出生窒息 的模型。采用神经行为学观察、HE 染色及透射电镜观察脑组织病理变化等方 法，对动物模型进行评价。 2 ．动物随机分成对照组、缺氧10min 组、缺氧20min 组，采用冰冻切片的免疫 荧光、Western blot 检测NeuroD 表达量的变化。 3 ．动物随机分成对照组、缺氧20min 组，一亚组分 13d、20d、27d 三个时间点 取材，采用冰冻切片的免疫荧光检测NeuroD、石蜡切片的免疫组化检测BrdU 表达的变化。另一亚组分6d、20d 两个时间点，TUNEL 法检测细胞凋亡。 【结果】 1．缺氧过程新生大鼠均出现全身紫绀、意识障碍等神经行为的异常。HE 染色可 见缺氧10min 海马CA1 区部分神经细胞肿胀，缺氧20min 神经细胞的损伤加 重。