色素上皮源性因对淋巴管内皮细胞生成的影响.pdf

色焘乞废源因子对，漭巴誉内皮细饱生成的影响 一中文摘要 目的建立稳定可行的淋巴管内皮细胞的体外培养和鉴定方法。探讨色素上 factor，PEDF)对淋巴管内皮细胞增殖和 皮源性因子(Pigmentepithelium-derived 游走的影响。旨在寻找安全、实用、有效的淋巴管生成抑制剂。 材料和方法取健康猪的胸导管内皮细胞，进行内皮细胞的原代培养。1．淋 巴管内皮细胞的分离、培养及传代。2．光镜、电镜观察淋巴管内皮细胞的形态和 超微结构特征。3．细胞鉴定实验：采用免疫细胞化学的方法，应用第Ⅷ因子相关 抗原免疫荧光法和淋巴管内皮细胞透明质酸受体．I(LYVE．1)抗体对培养的细胞 进行联合鉴定。4．抑制实验：采用划线法和MTr法观察色素上皮源性因子对淋 巴管内皮细胞增殖和迁移的影响。 结果1．光镜下淋巴管内皮细胞呈特征性“鹅卵石状或“铺路石状’’镶嵌 排列，并有接触抑制现象。2．透射电镜可见内皮细胞呈卵圆形、多角形或不规则 形，胞核大，胞质中含有大量小泡。3．经第Ⅷ因子相关抗原免疫荧光鉴定，内皮 细胞的胞质中出现黄绿色颗粒；经LYVE-1抗体标记，内皮细胞呈绿色，为典型 淋巴管内皮细胞。4．划线法：与对照