负载hbx抗原dc疫苗在人免疫重建荷人肝癌裸鼠模型体内诱导的特异性抗肝癌效应的实验研究.pdf

负载HBx抗原的DC疫苗在人免疫重建荷人肝癌裸鼠模型体内诱导的特异性抗肝癌效应的实验研究 中文摘要 中文摘要 目的： 制备由HBx抗原负载的DC疫苗，检测其在人免疫重建荷人肝癌裸鼠模型体 内的抗肿瘤作用，为肝癌的生物免疫治疗提供新的改良方式和科学依据。 方法： 1.稳定转染HBx 蛋白HepG2人肝癌细胞系的鉴定及培养：利用RT-PCR和 Westernblot法检测稳定转染HBx蛋白的HepG2人肝癌细胞系中HBx蛋白的表达； 确定稳定转染细胞株的G418筛选浓度。 2.人免疫重建裸鼠模型的建立及鉴定：将无免疫渗漏的12只裸鼠随机分为2 组：腹腔注射人外周血单个核淋巴细胞6只作为人免疫重建组，腹腔注射无菌PBS 6只作为空白对照组。观察小鼠生物学特征；ELISA检测小鼠外周血人IgG含量； HE染色法检测小鼠肝脾组织中淋巴细胞的浸润情况。 3.HBx抗原负载的DC疫苗在人免疫重建荷人肝癌模型体内的抗肿瘤作用观 GM-CSF IL-4 TNF-α 察：在体外培养人外周血单个核细