lps诱导小鼠巨噬细胞氧化应激在自噬中的作用机制研究.pdfVIP

protein-microtubule associated protein light chain 3，绿色荧 光蛋白-微管相关蛋白1轻链3）和质粒RFP-LC3 （Red fluorescent protein-microtubule associated protein light chain 3，红色荧 光蛋白-微管相关蛋白1轻链3）观察LPS作用下的Ana-1细胞的自噬现 象，免疫蛋白印记（Western Blot）法检测自噬基因BECN1蛋白和LC3 Ⅰ/ Ⅱ蛋白的表达。LPS作用氧化应激状态下的Ana-1细胞（LPS+ H O 2 2 处理组，外源性H O 浓度为12.5uM刺激Ana-1细胞2h后，再加入LPS浓 2 2 度为1ug/ml刺激Ana-1细胞4h），RT-PCR法检测自噬相关因子LC3的 mRNA表达水平变化，脂质体Lipofectamine2000转染质粒GFP-LC3和质 粒RFP-LC3观察自噬现象， Western Blot法检测自噬基因BECN1蛋白 和LC3 Ⅰ/ Ⅱ蛋白表达。维生素C抗氧化应激损伤处理后(维生素C浓度 为2