蛋白激酶c在胰素抵抗骨骼肌细胞中的作用.pdfVIP

f Y1 目 录 一、摘要 中文论著摘要…………………………………………．．1 英文论著摘要…………………………………………．．3 二、英文缩略语……………………………………………．6 三、论文主体 前言…………………………………………………7刖青…………………………………………………7 材料与方法……………………………．……………．．8 结果…………………………………………………11 讨论…………………………………．．……………．14 结论…………………………………………………15 四、本研究创新性的自我评价…………………………………．16 五、参考文献………………………………………………17 六、附录 综述…………………………………………………19 在学期间科研成绩………………………………………30 致{射…………………………………………………31 个人简介……………………………………………．．32 ·中文论著摘要· 蛋白激酶C在胰岛素抵抗骨骼肌细胞中的作用 -^上．-J一 刖 吾 胰岛素抵抗(InsulinResistance,IR)是指外周靶组织对胰岛素的敏感性和反应 性降低，导致生理剂量的胰岛素产生低于正常的生理效应，长期瓜和高胰岛素血 症会引发一系列病理状态，如肥胖、尤其是内脏肥胖、糖调节受损、T2DM、脂 肪肝、高血压、冠心病、脂质代谢紊乱等。瓜是葡萄糖耐量受损和T2DM的主要 特征，而胰岛素受体信号转导缺陷是取发生的主要原因。在体内，胰岛素主要通 Kinase 过IRS．1／P13．K／PKB(mct)信号途径促进葡萄糖转运。蛋白激酶B(ProteinB， 3-kinase，P13．K)的下游， PKB／Akt)位于磷脂酰肌醇3·激酶(Phosphatidylinositol 是P13．K受体蛋白激酶的主要靶点，PKB被P13．K激活后发生磷酸化，激活的PKB 可促进葡萄糖转运因子-4(Glucose factor-4，Glut-4)的转位和刺激葡萄 transport 糖的摄取，调节胰岛素代谢反应，如调节糖原合成、糖酵解等Ⅲ。 Kinase 蛋白激酶C(ProteinC，PKC)是细胞内信号转导通路上的一个重要成 员，它的表达及激活与瓜和糖尿病的发生发展密切相关。体内脂质增加可通过PKC 影响胰岛素信号转导通路，然而具体的作用机理还不是十分清楚。骨骼肌是胰岛 素刺激的葡萄糖摄取的主要靶组织，也是瓜发生的主要部位。本研究从胰岛素信 号转导途径出发，探讨棕榈酸诱导骨骼肌细胞产生取的分子机制及PKC在棕榈酸 诱导骨骼肌细胞瓜中的作用。 材料与方法 出生3．5天SD大鼠的骨骼肌细胞 DMEM培养基 优级胎牛血清 胰蛋白酶 棕榈酸(PalmiticAcid，PA) 罗格列酮 生物合成人胰岛素(诺和灵R) 葡萄糖检测试剂盒 白屈莱红碱(ChelerythrineChloride，cc) a．sarcometric actin单克隆抗体 罗丹明(TRITC)标记的小鼠抗大鼠二抗 PKB多克隆抗体 P．Ser473PKB多克隆抗体 碱性磷酸酶(ALP)标记的羊抗兔二抗 二氧化碳培养箱 倒置显微镜 超低温冷冻冰箱 Western blotting全：套设备 ECL成像仪 Prism 5软件 GraphPad 采用胰蛋白酶和I胶原酶联合消化、多次滤网过