异种活性脱细胞腱支架的初步构建
㈣Y261㈣8422
异种活性脱细胞肌腱支架的初步构建
博士研究生:周沫
指导老师:李宝兴
摘要
第一章 牛脱细胞肌腱支架制备
目的:采用多次脱细胞循环处理去除牛肌腱腱细胞、利用交联剂交联脱
细胞支架增强力学强度、过氧乙酸及冷冻干燥增加空隙率、最后进行灭菌处
理制备异种脱细胞肌腱支架,并通过多项检测指标评价制各的脱细胞肌腱支
架去除抗原和细胞成分的效果、检测交联程度和力学性能,评价体内外组织
相容性,为异种肌腱的应用提供实验依据。
方法:取健康成年牛腱,于-80℃深冻保存1个月,室温复融后进行a一半乳
糖苷酶消化及脱细胞处理:PBS缓冲液中浸泡数小时,根据实验设计选择添加
0【.半乳糖苷酶;胰蛋白酶溶液消化数小时,用含胎牛血清的DMEM培养基终止
胰酶消化:于聚乙二醇辛基苯基醚,脱氧胆酸钠混合液中脱细胞,更换脱细胞
溶液,重复脱细胞循环数次,PBS反复清洗;EDTA浸泡数小时;DMEM培养基
浸泡,PBS反复清洗:利用京尼平交联
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