转基因同种异体织工程软骨修复兔关节软骨缺损的初步研究.pdf

转基因同种异体组织工程软骨修复兔关节软骨 缺损的初步研究 硕士生姓名： 仲伟偎 指导教师： 张卫国 教授 专业名称： 外科学 摘 要 目的： 应用逆转录病毒载体将外源性人端粒酶逆转录酶(hTERT)基因整合 到兔关节软骨细胞的基因组中，使其获得永生化，并对其生物学特性进行 研究。以基因转染得到的永生化软骨细胞为种子细胞，复合骨基质明胶 Matrix (Bone Gelatin，BMG)构建组织工程软骨，对其修复兔关节软骨缺 损的能力进行评价，从而探讨转入hTERT基因的永生化软骨细胞作为软 骨组织工程种子细胞的可行性及BMG作为软骨组织工程支架材料的优越 性。 方法： 1．分离、培养兔关节软骨细胞并对其特有表型进行鉴定。通过阳离子 胞，并对转染后72小时内收集到的病毒上清进行浓缩，再感染分离得到 的第2代兔关节软骨细胞，并观察转染后GP2．293细胞和软骨细胞绿色荧 光蛋白GFP的表达。使用NIH3T3细胞对病毒原液和浓缩液进行病毒滴度 测定，并比较前后