巨噬细胞移动抑因子小干扰rna对肝癌细胞表达血管内皮生长因子的抑制效应.pdfVIP

广州医学院硕‘}：论文巨噬细胞移动抑制因子小于扰RNA对肝癌细胞表达血管内皮生长闪了的抑：b0效应 巨噬细胞移动抑制因子小干扰RNA对肝癌细胞表达 血管内皮生长因子的抑制效应 硕士研究生：伍兆锋 导 师：夏金堂教授 广州医学院附属广州市第一人民医院肝胆外科 中文摘要 factor， 目的观察巨噬细胞移动抑制因子(macrophagemigrationinhibitory MIF)小干扰RNA(smallinterferene RNA，siRNA)对肝癌细胞表达血管内皮 生长因子(vascularendothelialfactor，VEGF)的影响，并初步探讨MIF growth 在肝癌新生血管生成中的作用。 方法Wegem 情况；人工化学合成MIF 胞株；定量PCR检测MIF和VEGFmRNA；Westernblot检测MIF、VEGF和 p-MAPK蛋白的表达。 mRNA在肝癌组织中的 结果MIF、VEGF、P—MAPK蛋白和MIF、VEGF 表达明显较癌旁组织高。MIF蛋白在肝癌组织中的表达较癌旁组织高3．8+1．76 倍(，=11．02，PO．01)。肝癌组织中MIFmRNA的表达较癌旁组织高5．57+1．21 倍(f=6．54,PO．OI)，肝癌组织中VEGFmRNA的表达较癌旁组织高4．42士1．30 镪(、t-4．55．PO．05)o 一2一 广州医学院硕上论文巨噬细胞移动抑：捌因子小T-扰RNA对肝癌细胞表达血管内皮生长冈子的抑：剐效应 MIF siRNA以浓度50nMol／L和1 00nMol／L转染肝癌细胞株PLC和HepG2， MIF siRNA干预 并以对照siRNA转染PLC和HepG2做阴性对照。在50nMol／L 组中，PLC细胞MIF和VEGF mRNA的表达分别下调(78．8+7．2)％和 HepG2细胞MIF和VEGF mRNA和蛋白表达的下调值与对照 理的PLC和HepG2细胞中，MIF、VEGF siRNA组相比，差异有统计学意义(PO．01)。 MIF mRNA的表达 在100nMolFLsiRNA干预组中，PLC细胞MIF和VEGF mRNA的表达分别下 (78．7+1．2)％和(87．44．2．3)％。HepG2细胞MIF和VEGF mRNA 和蛋白表达的下调值与对照siRNA组相比，差异有显著的统计学意义(PO．01)。 MIFsiRNA mRNA 和蛋白在PLC和HepG2中的表达差异也有统计学意义(尸铆．0．5)。 MIF siRNA转染PLC和HepG2细胞24小时后，Westernblot检测p-MAPK MIF 蛋白的表达，并以MAPK为参照。50nMol／L siRN