树突状细胞体外导肿瘤引流淋巴结细胞抗肿瘤活性的研究.pdf

中 英 研 第 第 附图…………………………………………………………………29 1 附表………………．．．…………………_…………………………．3 讨论…………………………………………………………………33 小结…………………………………………………………………37 参考文献……………………………………………………………37 结论…………………………………………………………………………38 综述 树突状细胞抗肿瘤活性的研究进展……………………………39 致谢．．：………………………………………………………………………45 个人简历……………………………………………………………………46 ‘ 中文摘要 树突状细胞体外诱导肿瘤引流淋巴结细胞抗肿瘤活性的研究 摘 要 目的：采用肿瘤患者自体外周血来源单个核细胞体外培养成为成熟的 DC并加入患者自体的TDLN细胞中代替原有的受肿瘤抑制的DC，以研 究TDLN细胞的抗肿瘤活性。 方法： 1分离与培养人外周血树突状细胞(DC)；通过倒置显微镜下观察细胞生 长及形态变化情况。通过扫描电镜观察DC的超微结构。 2通过流式细胞技术测定从外周血中培养的树突状细胞的CD83、CDl叭 CD80、CD86的阳性表达率。 3取食管癌患者引流淋巴结组织进行体外培养，用流式细胞仪测定细胞免 疫分子表型。 细胞增殖反应的抑制作用。 变化； ‘结果： 1外周血单个核细胞来源DC的形态学外周血单个核细胞经GM．CSF、 IL．4于体外诱导培养5d后，呈现典型未成熟树突状细胞形态，细胞体积 较小，表面毛刺状突起较少，细胞成簇分布，呈集落样生长：加入TNF．0【 后1．2d，具有典型成熟特征的DCs，细胞体积较大，形态不规则，表面 中文摘要 有大量细而长的树突状突起．细胞中可见数量不等的细胞集落形成。 2电镜下观察可见，未加入肿瘤坏死因子的细胞体积增大不明显，表面有 部分细小的突起，呈现未成熟树突状细胞的形态；而加入TNF．0【组细胞 体积有所增大，表面毛刺状突起也明显增多，可见成熟的树突状细胞形态。 3流式细胞仪结果显示，将外周血单个核细胞于体外诱导培养第7d时， 率28．56i12．45％，两组间有统计学差异p0．05)。 胞阳性率为43．12+5．41％、CD8的细胞阳性率为38．76士4．83％。 5 对TEl细胞增殖有明显的抑制作用。其中两者比例为1：50，作用24小时， TEl细胞增殖的抑制率具有显著性差异(pO．05)。 6 时，对A375细胞增殖抑制率没有统计学差异。 … 7 pO．05)。 8 显降低，bax表达水平均明显升高。以1：50比例作用时，TEl细胞内抗凋 ．结论： 1 中文摘要 成熟DC。 的阳性表达率高，提示TNF．0【是刺激DC成熟的关键因子。 善、纯度较高的TDLN。 伤能力，提示TDLN细胞可能在体内已被致敏，有一定的特异性识别能 力，而添加DC可提高的是TDLN细胞的特异性杀伤能力。 5 1：50比例作用时杀伤率最高，与其他各比例相比，有统计学意义p0．05， 。 提示DCTDLN细胞的特异性杀伤能力存在剂量效应， 6 的特异性杀伤能力存在时间效应， TDLN的抗肿瘤活性，有可能作为一种有效的过继性细胞免疫治疗的新方 法a． 关键词：引流区淋巴结细胞；树突状细胞； 抗肿瘤活性；TEl；生 物治疗 · 英文摘要 Generationofenhancedantitumor of tumor reactivit