单管PCR-Pyrosequencing快速检测华法林代谢酶基因多态性方法的建立.pdfVIP

HEREDITAS (Beijing) 2011 11 , 33(11): 1283―1290 ISSN 0253-9772 技术与方法 DOI: 10.3724/SP.J.1005.2011.01283 单管PCR-Pyrosequencing 快速检测华法林代谢酶基因 多态性方法的建立 施宏, 虞闰六, 马金飞, 任绪义 , 310030 文章旨在建立一种单管、快速及高通量的华法林药物代谢酶相关基因多态性的检测方法。通过抽取人外 周血DNA, 应用带有生物素标记的扩增引物, 经PCR 扩增并制备焦磷酸测序单链模板, 于PyroMark ID 焦磷酸 测序仪上进行焦磷酸测序, 以Sanger测序法测序结果为对照, 观察分析的准确性。结果显示, 华法林药物代谢酶 的3 个相关基因多态性(CYP2C9*2、CYP2C9*3、VKORC1(-1693)) 于单管中可被同时检测, 一次可获得96