哺乳动物基因组靶向修饰阳性细胞富集的报告载体系统的研究进展.pdfVIP

哺乳动物基因组靶向修饰阳性细胞富集的报告载体 系统研究进展 1 1 1 2 1 白义春 ,徐坤 ,魏泽辉 , 马琤 ，张智英 1. 西北农林科技大学动物科技学院，杨凌 712100; 2. 陕西省兴平市畜牧局，兴平 713199 摘要：基因组靶向修饰技术对基因功能研究、基因治疗以及转基因育种研究都具有重要的意义和价值。近 年来发展起来的人工核酸酶如ZFNs 、TALENs 和CRISPR/Cas9 等的应用大大提高了基因组靶向修饰的效率。 但是由于核酸酶表达载体转染效率、核酸酶表达效率及活性以及基因组被打靶后的修复效率等因素在一定 程度上制约着基因组靶向修饰阳性细胞的获得。因此富集和筛选基因组靶向修饰阳性细胞是一个亟待解决 的问题。报告载体系统可以间接地反映核酸酶的工作效率并有效富集核酸酶修饰的阳性细胞，进而提高基 因组靶向修饰阳性细胞的富集和筛选效率。本文主要针对由非同源末端连接(Non-homologous end j oining，NHEJ)和单链退火(Single-strand annealing，SSA)两种修复机制分别介导的报告载体系统的 原理和应用进行了详细的介绍，以期