棉花Trihelix转录因子GhGT29基因的克隆及其功能分析.pdfVIP

Hereditas (Beijing) 2015 年 12 月, 37(12): 1218―1227 研究报告 棉花Trihelix 转录因子GhGT29 基因的克隆及 功能分析 1 1 2 2 3 李月 ，刘晓东 ，董永梅 ，谢宗铭 ，陈受宜 1. 新疆农业大学农学院，农业生物技术重点实验室，乌鲁木齐 830052； 2. 新疆农垦科学院生物技术研究所，作物种质创新与基因资源利用兵团重点实验室，石河子 832000； 3. 中国科学院遗传与发育生物学研究所，国家植物基因组重点实验室，北京 100101 摘要:Trihelix 转录因子在植物抵御各种逆境胁迫中扮演重要作用，克隆棉花Trihelix 转录因子基因并分析其表 达特性和功能，为最终利用转基因手段改良棉花抗逆性奠定基础。本文依据生物信息学分析，采用RT-PCR 方 法从陆地棉中克隆了一个Trihelix 转录因子基因，命名为 GhGT29(GenBank 登录号：JQ013097) 。该基因最大 开放阅读框(ORF)为 1092 bp，编码363 个氨基酸，预测分子量为40.9 kDa ，等电点为5.45。SMART 蛋白结构 预测发现，该蛋白含有 1 个 Trihelix 家族典型的 SANT 结构域。系统进化树分析表明，GhGT29 属于 Trihelix 转录因子SH4 亚家族，与拟南芥AtSH4 -like1 、AtSH4 -like2 亲缘关系最近。实时荧光定量PCR 结果表明，GhGT29 受高盐、干旱、低温胁迫和 ABA 诱导表达；GhGT29 在陆地棉的根、茎、叶、花、开花后当天胚珠以及开花 后 12 d( 12 DPA) 纤维中均有表达，其中在花中表达量最高，在茎中表达量最低。利用拟南芥原生质体系统进行 分析，结果显示GhGT29 主要定位于细胞核中，并且具有转录激活活性。以上结果表明GhGT29 基因可能参与 棉花逆境信号通路中对抗逆功能基因表达的调控。 关键词:棉花；Trihelix 转录因子；非生物胁迫；亚细胞定位；转录激活 Cloning and functional analysis of the cotton Trihelix transcription factor GhGT29 1 1 2 2 3 Yue Li , Xiaodong Liu , Yongmei Dong , Zongming Xie , Shouyi Chen 1. Key Lab of Agro-Biotechnology, College of Agronomy, Xinjiang Agricultural University, Urumqi 830052, China; 2. Biotechnology Research Institute, Xinjiang Academy of Agricultural and Reclamation Science/Xinjiang Production and Con- struction Group Key Laboratory of Crop Germplasm Enhancement and Gene Resources Utilization, Shihezi 832000, China; 3. Institute of Genetics and Developmental Biology, Chinese Academy of Sciences/National Key Laboratory of Plant Genomics, Beijing 100101，China Abstract: Trihelix transcription factors are important proteins involved in response to abiotic stresses in plants. 收稿日期: 2015−07−15; 修回日期: 2015−09−07 基金项目: 国家转基因生物新品种培育科技重大专项(编号：2009ZX08009-090B) ，国家自然科学