乌苯美司对人多性骨髓瘤患者骨髓基质细胞的抑制.pdf

IIlll l I 11111 11111U III Y1 目 录 一、摘要 中文论著摘要………………………………………………………………………1 英文论著摘要……………………………………………………………………”4 二、英文缩略语………………………………………………………………………·7 三、论文 论文一 前言…………………………………………………………………………………………………………·8日U百…………………………………………………………………………………………………………。8 材料与方法………………………………………………………………………·9 实验结果…………………………………………………………………………·18 讨论………………………………………………………………………………………………………“20 结论………………………………………………………………………………………………………”21 四、本研究创新性的自我评价………………………………………………………22 五、参考文献…………………………………………………………………………24 六、附录 综j苤………………………………………………………………………………………………………”26 在学期间科研成绩………………………………………………………………35 致{射………………………………………………………………………………………………………”36 个人简介…………………………………………………………………………37 ·中文论著摘要· 乌苯美司对多发性骨髓瘤患者骨髓 基质细胞的抑制 目 的 通过观察乌苯美司(百士欣)对多发性骨髓瘤患者骨髓基质细胞表达细胞因 子的影响，探讨乌苯美司对骨髓瘤细胞的抑制。 方法 1、细胞培养 骨髓瘤基质细胞来源于3名III期骨髓瘤患者，诊断及分期符合国内标准骨髓 瘤培养应用以下方法：取骨髓肝素钠混合液10ml，用PBS稀释至20ml，缓慢加入 常规培养。每隔2-3日换液1次。取第三代、四代细胞应用于实验。 2、药物浓度设定 200099／ml。 3、采用不同剂量乌苯美司处理骨髓基质细胞24小时，0．25％胰酶 次弃上清，一80。C保存备用。 4、半定量RT-PCR法检测乌苯美司处理前后的骨髓瘤患者骨髓基 作进行，以未经乌苯美司作用的骨髓基质细胞做为对照。应用凝胶电 泳分析系统软件分析PCR扩增产物与GAPDH的灰度比值。 5、Western blot检测乌苯美司处理前后人骨髓瘤患者骨髓基质 细胞内Bcl一2蛋白的表达。以未经乌苯美司作用的骨髓基质细胞做为 对照。应用凝胶电泳分析系统软件分析Bcl一2与B—actin的灰度比值。 6、根据资料性质选用t检验，使用SPSSl3．0统计学软件对实验 结果进行分析 结 果 乌苯美司作用骨髓瘤基质细胞24小时，伴随药物浓度增加，ICMA．1、IL．6 基因mRNA的表达逐渐下降。Westenblot检测Bcl．2蛋白的表达也逐渐下降。且 两者均有明确的剂量依赖。 结论 本研究结果显示，乌苯美司处理过的骨髓瘤患者骨髓基质细胞IL．6、ICAM-l 基因mRNA的表达明显减低，但具体的作用机制不清，推测可能与乌苯美司下调 凋亡相关蛋白Bcl．2表达有关。对骨髓瘤基质细胞打击，可直接影响骨髓瘤的生 长，将是一种崭新的抗肿瘤的思路。 关键词 乌苯美司；骨髓瘤；基质细胞；IL．6；ICAM．1；Bcl．2