嗅鞘细胞对螺旋经节细胞离体培养的影响及其机制的研究.pdf

中文摘要 第一部分 嗅鞘细胞的体外培养、纯化及鉴定 cells 目的：纯化培养和鉴定成年大鼠嗅球嗅鞘细胞(olfactoryensheathing OECs)，为后续实验做好准备。方法：取成年大鼠嗅球神经层，经酶消化的方法 获得含有OECs的混合细胞悬液，采用多次长时差速贴壁的方法纯化OECs，用 荧光显微镜下观察OECs的形态并统计其纯度。结果：采用多次长时差速贴壁的 方法能够去除绝大部分的污染细胞，包括成纤维细胞和星形胶质细胞，接种的 OECs约24小时后贴壁，倒置相差显微镜下观察见大部分细胞胞体呈梭形、部 分细胞胞体为多角形，伸出突起；细胞在接种培养的前2d生长缓慢，2d后培养 约92％的细胞为P75sTR(+)，分布在突起、胞体，其中胞核被深染；约12％ 的细胞为GFAP(+)。结论：采用多次长时差速贴壁的方法能够获得实验所需 能够显著促进OECs的增殖。 关键词： 嗅鞘细胞；培养；免疫荧光化学染色 第二部分 嗅鞘细胞对耳蜗螺旋神经节细胞离体培养的影响 目的：探索在离体实验中OECs有无促进耳蜗听觉