光皮桦miR164及靶基因NAC1在低氮胁迫中的表达分析.pdfVIP

Hereditas (Beijing) 2016 年2 月, 38(2): 155 ―162 研究报告 光皮桦miR164 及其靶基因NAC1 在低氮胁迫中的表达 分析 吴骏，张俊红，黄蒙慧，朱敏慧，童再康 浙江农林大学，亚热带森林培育国家重点实验室培育基地，临安 311300 摘要: 氮是植物生长发育所必需的大量营养元素，植物缺氮后严重影响地上部分生物量的积累，因此，揭示植 物如何抵抗或适应低氮胁迫的分子机制具有重要意义。杨树(Populus tremula × P. alba)NAC1 (NAM, ATAF, CUC 1)基因位于调控网络上游，在低氮环境下调控下游关键基因的表达，进而调控根系生长以抵抗低氮胁迫。本文 以光皮桦(Betula luminifera)G49-3 无性系组培苗为材料，探讨了miR164 及其靶基因NAC1 对低氮胁迫的响应。 通过RACE 技术克隆了光皮桦NAC1 基因(GenBank 登录号：KT900889) ，全长1497 bp，编码358 个氨基酸， N 端具有高度保守的NAM 结构域；运用5′-RACE 验证了NAC1 为miR164 靶基因，切割位点在第 10 和 11 位 碱基之间；采用qRT-PCR 分析miR164 与靶基因NAC1 在低氮胁迫时的表达模式，发现miR164 表达在根中的 低氮处理前期(4 d)受到抑制，而后升高，而茎叶中表达模式与根不同；靶基因NAC1 与miR164 表达水平呈负 相关，且在恢复实验组(重新添加全营养液) 中，根中 miR164 表达上升，NAC1 显示出相应的表达变化，暗示 miR164 及其靶基因NAC1 可能在低氮胁迫响应中发挥调控功能。本研究结果有助于揭示miR164 对NAC1 在低 氮胁迫响应中转录后水平的分子调控机制，为进一步研究 miR164-NAC1 在低氮胁迫响应中的功能提供有价值 的信息。 关键词: 光皮桦；低氮胁迫；miR164 ；靶基因；表达分析 Expression analysis of miR164 and its target gene NAC1 in re- sponse to low nitrate availability in Betula luminifera Jun Wu, Junhong Zhang, Menghui Huang, Minhui Zhu, Zaikang Tong Nurturing Station for the State Key Laboratory of Subtropical Silviculture, Zhejiang Agriculture and Forestry University, Lin’an 311300, China Abstract: Nitrogen, an essential macronutrient for the growth and development of plants, affects above- ground biomass accumulation dramatically. Thus, it is very important to reveal the molecular mechanisms of how 收稿日期: 2015−05−26; 修回日期: 2015−07−28 基金项目: 国家自然科学基金项目(编号和浙江省竹木新品种选育重大科技专项(编号：2012C12908-8)资助[Supported by the National Natural Science Foundation of China (No. and Zhejiang Province Science and Technology Support Program (No. 2012C12908-8)] 作者简介: 吴骏，在读硕士研究生，专业方向：林木分子生物学。E-mail : wujunjames@126.com 张俊红，副教授，研究方向：植物逆境生理与分子生物学。E-mail : zjh6719036@163.com 吴骏和张俊红为共同第一作者。 通讯作者: