小檗碱对人脂肪胞脂联素、瘦素分泌的影响.pdfVIP

小檗碱对人脂肪细胞脂联素、瘦素分泌的影响 中文摘要 目的： 1、原代培养人前脂肪细胞，并诱导分化为脂肪细胞。 2、研究小檗碱对人脂肪细胞脂联素、瘦素分泌的影响。 方法： 1、原代分离培养人大网膜前脂肪细胞： 选择择期开腹手术病人，无全身代谢及内分泌疾病，无服用干预糖及脂肪代谢的药 物史。取无菌条件下新鲜切除的人大网膜脂肪组织，剔除肉眼可见的结缔组织与血管， 充分剪碎的脂肪组织用I型胶原酶消化，消化液通过尼龙膜过滤，滤液以600Xg离心 10分钟后，加入DMEM／F12基础培养基制成细胞悬液，细胞计数后接种。 2、前脂肪细胞诱导分化为脂肪细胞： 37℃、5％C02孵育12小时细胞基本贴壁后，换分化培养液诱导分化。前3天用含 分对照组和小檗碱组，孵育细胞24小时。分别于干预药物前后收集细胞上清，冻存于 一80℃，备同期同批ELISA测定APN和Lp． 3、测定培养液中APN和Lp蛋白含量： 量。 4、统计学处理： 有统计学意义。 结果： l、成功培养人前脂肪细胞。利用胶原酶消化法可培养出成分均一的前脂肪细胞。 2、成功诱导人前脂肪细胞分化为脂肪细胞。在活体外，人前脂肪细胞在诱导分化因子 作用下可被诱导分化为脂肪细胞。