第七章发酵工程技术概论精要.ppt

三、补料分批发酵 将种子接入发酵反应器中进行培养，经过一段时间后， 间歇或连续补加新鲜培养基，使菌体进一步生长的培养方法。 应用广泛，用于氨基酸、抗生素等工业 补料分批发酵的优缺点 优点：与分批发酵相比 延长次级代谢产物的生产时间 可避免在分批培养过程中因一次性投糖过多造成细胞大量生长，耗氧过多的状况 达到高浓度细胞培养 稀释有毒代谢产物 优点：与连续发酵相比 因为操作时间有限，降低了染菌，避免了遗传不稳定性 最终产物浓度较高，有利于产物的分离 使用范围广，在生产次级代谢产物和细胞高浓度培养中普遍采用。 缺点： 由于没有物料取出，产物的积累最终导致生产速率的下降 由于物料的加入增加了染菌机会 第五节 发酵工艺控制 一、培养基的影响及其控制 碳源：占菌体干物质的50%以上是碳 主要功能：提供能源、菌体成分、产物碳架 来源：糖类、脂肪、有机酸、碳氢化合物 速效碳源：如葡萄糖，能较迅速的参与代谢、合成菌体和产 生能量，并产生分解产物，有利于菌体的生长，但有的分解 代谢产物对产物的合成可能产生阻遏作用； 迟效碳源：如淀粉、乳糖、油脂等，被菌体缓慢利用，有利 于延长代谢产物的合成，特别有利于延长抗生素的分泌期， 为许多微生物药物的发酵所采用。 氮源：占菌体干物质的10% 主要功能：构成细胞物质、构成蛋白质等产物的成分 来源：无机氮源、有机氮源（速效氮源氨基酸、玉米浆、迟 效氮源黄豆饼粉、花生饼粉、棉籽饼粉） 速效氮源：如氨基酸、玉米浆等，有利于菌体的生长； 迟效氮源：如黄豆饼粉、花生饼粉等，有利于代谢代谢产物 的形成 无机盐和微量元素 主要功能：构成菌体原生质的成分（S、P）、作为酶的组成 部分或维持酶的活性（镁、铁、锌、钙、磷等） 、调节细胞 的渗透压（NaCl、KCl等）和pH，参与产物的合成 水：物质溶解和生化反应的基础 功能：机体的重要组成成分、参加一些代谢反应、良好溶剂 和热导体 二、温度的影响及其控制 1.影响发酵温度变化的因素 （1）生物热：微生物在生长繁殖过程中产生的热能；与培 养基成分、培养时间、呼吸强度有关 （2）搅拌热：搅拌器转动引起的液体之间和液体与设备之 间摩擦所产生的产生的热量 （3）蒸发热：水分蒸发所需热能 （4）辐射热：罐内外气温差使热能向大气辐射的热量 2. 温度的选择与控制 （1）最适发酵温度的选择：最适生长温度、最适生产温度 变温发酵，如青霉素发酵 30℃5h---25℃35h---20℃85h--- 25℃40h---放罐；青霉素产量比25℃恒温发酵高14.7% （2）温度控制 一般不需加热，冷却水（冷冻盐水）通过夹层循环冷却 三、溶氧的影响及其控制 1.溶氧的影响 最适氧浓度：菌体生长或产物合成最适浓度范围 临界氧浓度：满足微生物呼吸的最低氧浓度 2.发酵过程的溶氧变化 溶氧异常下降（污染好气杂菌，菌体代谢异常，设备故障） 溶氧异常升高（污染噬菌体，菌体代谢异常） 3.溶氧浓度的控制 溶氧浓度决定因素：供氧和需氧两方面。 供氧方面： 调节搅拌转速 调节通气速率 需氧方面： 菌体浓度：耗氧量、氧传递速率 基质种类和浓度 培养条件：如温度、中间补水等 四、pH的影响及其控制 1. pH对发酵的影响 影响酶的结构和活性 影响微生物对基质的利用速率和细胞的结构 影响微生物细胞膜的电荷状况 影响代谢方向 2. pH的变化 取决于所用的菌种、培养基的成分、培养条件 3.发酵pH的确定和控制 （1）发酵pH的确定：菌种、培养基组成、培养条件、温度 微生物发酵的最适pH范围一般在5~8之间，根据实验确定， 即配制不同初始pH的培养基，考察发酵情况。 （2）发酵pH的控制 常用的控制方法有： 调整发酵培养基的基础配方达到适当配比，使pH变化在合适范围内 通过加酸碱：硫酸铵、氨水 采用中间补料的方法：如尿素 第六节 发酵产物的提取 一、吸附法 利用适当的吸附剂（活性炭、白陶土、氧化铝等），在 一定的pH条件下，使发酵液中的抗生素被吸附剂吸附，然后 改变pH，以适当的洗脱剂（一般是有机溶剂）把抗生素从吸 附剂上解吸下来，以达到浓缩和纯化的目的。 优点：操作简单，原料易解决，成本低 缺点：吸附剂吸附性能不稳定，选择性不高，不能连续操 作，影响环境卫生，所以一般不采用 二、沉淀法 是指利用某些抗生素具有两性的性质，使其在等电点时 从溶液中沉淀出来或在一定pH条件下，能与某些酸、碱或金 属离子形成不溶性或溶解度很小的复盐，使抗生素从发酵滤 液中沉淀下来，以及改变pH等条件时，此种复盐又易分解或 重新溶解的特性，来提取抗生素的一种方法。 优点：设备简单，原料易解决，节省溶剂，成本低，收率高 缺点