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低温胁迫对玉米幼苗生理指标的影响概述.doc
低温胁迫对玉米幼苗生理指标的影响
摘要:本实验把玉米幼苗培养完成后,分别在4℃和常温(其它条件相同)处理24h,并测定在两种不同温度下玉米各种生理指标(叶绿素含量、植物组织水势、抗逆性、根系活力、过氧化物酶活性),分析实验结果,找出低温对玉米幼苗生长有哪些影响。对培育抗低温品种提供基础。
关键词:低温胁迫,玉米幼苗,生理生化指标
植物的抗寒性分为抗冷性和抗冻性。许多喜温植物虽然不能抵抗零度以下低温的冰冻伤害, 但对零度以上低温具有一定的忍耐性, 即具有抗冷性。低温在一定程度上破坏细胞膜, 从而影响膜系统维持的生理功能。研究指出, 大部分植物在温度介于0~15℃之间时一系列生理功能被破坏。根据对低温的抗性将植物分为两类: 低温敏感型, 如玉米(极限温度5℃),香蕉(极限温度15℃);低温非敏感型, 这类植物在0~15℃之间时受冷害的迹象不明显。另一方面, 植物对冷胁迫具有忍受力, 表现出许多从而提高低温忍受力,如可溶性蛋白、糖及游离氨基酸含量升高, 产生较多的胁迫激素ABA等。不同植物, 甚至同一植物低温适应性反应由于原产地不同, 其忍耐低温的能力不同。低温冷害是限制植物分布及农业生产的重要因素, 也是植物引种必须首先考虑的问题。研究表明, 植物的低温伤害机理首先涉及到对膜系统的破坏, 膜脂相变,从而影响膜系统维持的生理功能。
黑龙江属高寒地区,玉米为低温敏感型植物,极限温度为5℃,是我国北方主要栽培作物之一,是改善人民生活,出口外贸的重要物质之一,对发展农业、畜牧业具有十分重要的意义。因此此次研究低温胁迫对玉米的伤害有重大的实际意义。
1 材料与方法
1.1材料
九单57
1.2材料培养
各选吉单57与吉单48玉米种子各700粒左右,先用蒸馏水将种子洗干净,然后将种子方放入已在底部放入湿纱布的大烧杯中,上方盖上湿纱布,放在37℃保温培养箱中进行催芽。将催芽成功的玉米种子摆在沙培基中,用少量沙土覆盖并用浇水,保持一定的湿度,并在温箱中培养两周。取出一部分玉米幼苗放在4℃的冰箱中培养24小时做低温处理,作为实验前的准备。
1.3 生理指标测定
1.3.1 叶绿素含量测定:分光光度计丙酮法
1.3.1.1原理根据叶绿体色素提取液对可见光谱的吸收,利用分光光度计在某一特定波长测定其吸光度即可用公式计算出提取液中各色素的含量。
根据朗伯—比尔定律,某有色溶液的吸光度A与其中溶质浓度C和液层厚度L成正比,即A=αCL式中:α比例常数。当溶液浓度以百分浓度为单位,液层厚度为1cm时,α为该物质的吸光系数。各种有色物质溶液在不同波长下的吸光系数可通过测定已知浓度的纯物质在不同波长下的吸光度而求得。
如果溶液中有数种吸光物质,则此混合液在某一波长下的总吸光度等于各组分在相应波长下吸光度的总和。这就是吸光度的加和性。今欲测定叶绿体色素混合提取液中叶绿素a、b和类胡萝卜素的含量,只需测定该提取液在三个特定波长下的吸光度A,并根据叶绿素a、b及类胡萝卜素在该波长下的吸光系数即可求出其浓度。在测定叶绿素a、b时为了排除类胡萝卜素的干扰,所用单色光的波长选择叶绿素在红光区的最大吸收峰。
叶绿素a、b的丙酮溶液在的最大吸收峰分别位于663、645nm处。nm下叶绿素a、b在该溶液中的吸光系数的分别为82.04和9.27;在645nm处的吸光系数分别为16.75和45.60。根据:
A663=82.04Ca+9.27Cb (1)
A645=16.76Ca+45.60Cb (2)
(1) (2)663nm和645nm为叶绿素溶液在663nm和645nm处的吸光度Ca Cb分别为叶绿素a、叶绿素b浓度(1) (2)
Ca=12.72 A663—2.59 A645 (3)
Cb=22.88 A645—4.67 A663 (4)
将Ca+Cb相加即得叶绿素总量CT
CT = Ca十Cb=20.A645—8.05 A663 (5)
从公式(3)、(4)、(5)可以看出,,就可计算出提取液中的叶绿素a、b浓度b在652nm的吸收峰相交,两者有相同的吸光系数(均为30.5),也可以在此波长下测定一次吸光度(A652)而求出叶绿素a、所测
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