nrf2及nq1在膀胱癌中的表达及意义.pdf

目 录 中文摘要…………………………………………………………………l 英文摘要…………………………………………………………………4 研究论文Nrf2及NQ01在膀胱癌中的表达及意义 前言………………………………………………………………………………………．7日U吾………………………………………………………………………………………‘7 材料与方法…………………………………………………………．8 结果………………………………………………………………………………………．11 附图…………………………………………………………………．13 附表………………………………………………………………………………………．16 讨论………………………………………………………………………………………．18 结{念………………………………………………………………………………………．22 参考文献……………………………………………………………22 综述膀胱癌发生发展分子机制研究新进展…………………………一26 致谢………………………………………………………………………………………………33 个人简历…………………………………………………………………34 中文摘要 Nrf2及NQ01在膀胱癌中的表达及意义 摘 要 目的：膀胱癌是泌尿系肿瘤中最常见的肿瘤，其发生发展是一个多基 因多阶段的过程，是环境和遗传因素共同作用的结果。高发、多发、复发 为其特点，浅表性肿瘤易复发，浸润性和转移性肿瘤预后则较差。从功能 角度看，膀胱癌属蛋白组性疾病。因此在研究癌基因及抑癌基因的同时肿 瘤专家们开始关注癌细胞表面向细胞核内信息传递过程，试图揭示肿瘤的 子家族成员，是参与生物体内抗氧化应激反应的一种重要转录因子。 白。大量的研究证实Nrf2可在肝脏、消化道、肺脏、心血管系统和神经 系统中高表达，究其原因是因为Nrf2作为抗氧化元件，能够减少有害的 内源性和外源性的刺激物对正常细胞的损伤。研究表明Nr也参与了多种 器官的抗氧化反应，在氧化应激反应中发挥了重要作用。目前Nrf2在肾、 肺、肝等代谢器官中的作用研究较多，非代谢器官中的作用研究较少，且 大多为动物实验，人体病理标本实验研究报道较少。研究表明Nr也在促 进肝脏解毒的同时会增加膀胱致癌物质如4一氨基联苯、丁基氢醌的暴露 机会。本研究拟检测Nrf2、NQ01分别在膀胱癌组织及癌旁组织中的表达 水平，探讨Nrf2／ARE信号传导通路在膀胱癌中的作用及其机制，从而进 一步了解膀胱癌的发病机制，为膀胱癌的诊治提供新的思路。 科住院手术病人的46例膀胱癌组织和18例癌旁组织(距瘤体边缘5cm 以外，病理证实为正常膀胱组织)，其中男性26例，女性20例，年龄45 至77岁，平均年龄56．6岁，全部病例术前均未经任何放疗、化疗。标本 分为两份，一份经10％甲醛溶液固定，石蜡包埋，4岬厚连续切片，另 一份保存于液氮中。根据世界卫生组织(WHO)2004年分类标准进行病 分期标准进行临床分期：非肌层浸润性膀胱癌(T矿T1)30例，肌层浸润 性膀胱癌(T2一T4)16例。 中文摘要 1．免疫组织化学方法检测：从蛋白水平检测46例患者膀胱癌组织和 的阳性表达率之间的差异，以及与病理分级、临床分期及转移的关系。采 与NQ01关系采用Pearson相关分析。 2．Western blotting检测：将膀胱癌组织及癌旁组织于冰浴下制成匀浆， 离心分离取上清液，进行蛋白定量，取蛋白提取液100pg，按比例与上样 缓冲液混匀，煮沸，上样，进行SDS一聚丙烯酰胺凝胶电泳，半干转膜法 至PVDF膜上，置于封闭液中封闭，随后与相应的一抗、二抗试剂反应， 用化学发光法检测结合区带，数码成像分析系统软件对结果进行定量分 光密度的比值做为蛋白表达的相对表达值，采用配对t检验进行统计学分 析。 结果： 1．免疫组织化学染色结果显示：Nr也蛋白在膀胱癌组织中及癌旁组 蛋白在膀胱癌组织中及癌旁组织中阳性表达率分别71．7％和22．2％，差异 瘤分级、临床分期及浸润转移呈正相关；Nrf2与NQ01在膀胱癌组织中