大鼠视网膜干细的培养及增殖和分化能力的研究.pdf

摘 要 【背景】目前眼科医生对一些直接损害视网膜细胞的疾病，如青光眼、视网膜变 性疾病等仍无有效的治疗办法，而视网膜干细胞的研究为治疗这些疾病带来了希 望。视网膜干细胞的体外培养、增殖和分化的研究已经取得了一定的进展，但也 存在着培养体系不统n一、增殖和分化机制不明确等问题。对视网膜干细胞的进 一步深入研究可以为将来的临床应用创造条件。 【目的】探索应用改良的方法培养大鼠视网膜干细胞，并比较不同年龄段大鼠视 网膜干细胞增殖和分化能力的差异。 【方法】使用含血清培养基直接培养的方法对取材于15日龄胚鼠、出生24h内 大鼠和出生5d大鼠视网膜神经层的视网膜混合细胞进行培养和传代。使用免疫 荧光染色和RT-PCR的方法研究视网膜干细胞的增殖和分化情况，并比较不同年 龄段大鼠之间的差异。 【结果】改良的培养方法成功地培养了大鼠视网膜干细胞并进行了传代。免疫荧 光染色显示随着传代的进行，视网膜干细胞增殖并占据优势，同时逐渐向神经节 细胞方向分化。RT-PCR显示随着传代的进行，15R龄胚鼠视网膜干细胞的 Musashi和Nestin mRNA表达水平逐渐上升； mRNA表达水平基本不变，Thy-