槐耳清膏诱导人腺癌细胞a549凋亡的研究.pdf

摘要 目的： 以人肺腺癌细胞A549为研究对象，通过不同方法研究槐耳清膏对 A549细胞的生长抑制和诱导凋亡的影响，并初步研究其诱导凋亡的作用 机制，为进一步深入研究其诱导肺腺癌细胞凋亡的分子机制奠定基础，也 为应用槐耳清膏治疗肺癌提供理论和基础实验依据。 方法： 应用MTT法检测该药对A549生长抑制作用；倒置相差显微镜、荧 光倒置显微镜下观察A549的形态学变化；离心柱式DNA抽提试剂盒提 取肿瘤细胞DNA后，应用琼脂糖凝胶电泳分析槐耳清膏对A549的凋亡 诱导作用；流式细胞仪检测凋亡细胞以及分析细胞周期；采用免疫印迹法 检测p53，bel．2的蛋白水平变化． 结果： MTT法检测槐耳清膏对人肺腺癌细胞A549的生长抑制作用的结果 发现随着药物浓度的升高而增强，到3mg／ml时达到高峰；随着药物作用 时间延长，细胞生长抑制率随之增加，不同浓度药物作用到36h均达到高 峰，其中3mg／ml槐耳组细胞生长抑制率均值为39．3％，与顺铂阳性对照 细胞在倒置相差显微镜下可以见到细胞变形，细胞膜完整但是周围有发泡 现象，晚期能看到细胞膜皱缩、凹陷，甚至出现凋亡小体；荧光染色可以 看到浓染致密的荧光颗粒，新月形改变，固缩或者片段化的细胞核；DNA 琼脂糖凝胶