白血病儿童骨髓充质干细胞的分离、培养及其生物学特性和免疫调节功能的初步研究.pdfVIP

白血病儿童骨髓间充质干细胞的分离、培养及其生物学特性和免疫调节功能的初步研究 白血病儿童骨髓间充质干细胞的分离、培养及其生物 学特性和免疫调节功能的初步研究 中文摘要 目的通过体外实验研究白血病儿童骨髓来源的间充质干细胞(mesenchymal stem cells，MSCs)的生物学特性及其免疫调节作用，从而探讨自血病儿童骨髓 来源的MSCs在白血病儿童化疗后实行自体回输的可行性及可能出现的免疫重 建作用。 方法通过Ficoll．Hypaque梯度密度离心法分离出白血病儿童骨髓单个核细胞， 胞生长形态，瑞氏染色观察细胞核浆比例及形态，MTT法检测细胞增殖，流式 细胞术(flow cytometry，FCM)检测免疫表型，油红O染色及茜素红染色检测 其向脂肪及骨细胞分化等观察其生物学特性。取外周血单个核细胞(Peripheral bloodmononuclear 接触的共培养、transwell体系的细胞非接触性共培养，在培养第5天后收集悬浮 细胞，用LDH法检测各组中MNCs的增殖情况，用ELISA方法检测单独MNCs、 穿孔素(pefforin)的分泌情况，再用流式细胞术分析单独MNCs、不同比例 CD4、CD25的免疫表型表达