粗壮脉纹孢菌发酵豆渣生产低聚糖研究.pdfVIP

摘要 摘要 本文以豆制品加工副产物——豆渣为原料，利用本实验室从江西传统发酵 食品中筛选分离得到的具有高产纤维素酶和D．胡萝卜素能力的菌株——粗壮脉 crassa)对其进行发酵，分析探讨发酵过程中营养成分的变 纹孢菌(Neurospora 化规律。并以发酵后豆渣中的低聚糖为对象，研究了发酵豆渣中低聚糖的最佳 提取工艺条件、低聚糖的分离纯化工艺及低聚糖的组成；并利用体外发酵技术 评价了发酵豆渣中低聚糖的功能性，以便为低聚糖的进一步开发利用提供科学 支持。得到的主要结果如下： crassa发酵豆渣过程中，随着发酵时间的延长，豆渣培养基 1、Neurospora 的回收率逐渐下降，至48h之后趋于稳定；粗纤维降解率和粗蛋白质含量呈上 h之后保持恒定；粗脂肪和类胡萝卜素含量则先呈上升 升趋势，且在发酵40．48 趋势，增加至峰值后又逐渐下降，但粗脂肪在下降到一定程度后趋于稳定；可 溶性总糖含量随着发酵时间的延长而上升，至峰值时又缓慢下降，之后又回升 并在48h后趋于稳定。 2、经过单因素实验和正交实验优化发酵豆渣中低聚糖的提取工艺，得到最 优提取工艺条件为：料液比1：25，提取时间为90min，提取温度为70℃，乙醇 浓度为50％，提取2次。在此最优提取工艺条件下，发酵豆渣中低聚糖得率为 11．91％。 3、采用Sevag法除蛋白，AB．8大孔树脂动态吸附脱色，对低聚糖粗提液进 行纯化处理。结果表明：蛋白质去除率达67．21％，脱色率62．41％，低聚糖保留 率分别为95．98％和91．22％，这两种方法能够很好的纯化低聚糖。纯化后的低聚 糖经高效液相色谱技术分离，得到2个分离组分(组分A和组分B)；通过 HPLC．ESI．MS和红外吸收光谱等技术的进一步分析，组分B具有m／z341去质 子准分子离子峰，这是一个二糖分子去掉一个质子得到的；红外吸收光谱分析 其具有糖类化合物的特征吸收峰，其中874．6 cmd是吡喃型p．型C—H变角振动 的特征吸收峰，因此可以确定组分B为纤维二糖。 4、将分离纯化后的低聚糖样品进行体外发酵实验，研究其体外发酵特性。 实验发现：800 mL) megL低聚糖组具有良好的发酵特性，产气量(7．25±O．16 mL) 显著低于对照组(7．98±0．42mL)(Po．05)，显著高于葡萄糖组(6．49±0．44 摘要 (PO．05)，800 mg／L低聚糖组最低pH为4．95；随着低聚糖质量浓度的增加， 发酵液NH3．N含量呈下降趋势，且在lg／L时最低，为27．32±7．69mg／L；800mg／L 低聚糖接种肠道粪便产乙酸含量最高，达到114．81gmol／mL，且所产短链脂肪酸 总含量最高，为226．37 gmol／mL。 关键词：豆渣；粗壮脉纹孢菌；低聚糖；体外发酵；营养成分 III Abstract ABSTRACT fromfermented residewere Inthis soybean research，theoligosaccharides as of u