拟南芥液泡膜水孔蛋白的互作蛋白AtSM34 参与种子萌发的渗透胁迫响应.pdfVIP

2011 年 第 56 卷 第 30 期：2486 ~ 2498 《中国科学》杂志社 专辑: 娄成后教授诞辰 100 周年纪念 论 文 SCIENCE CHINA PRESS 拟南芥液泡膜水孔蛋白的互作蛋白AtSM34 参与种子 萌发的渗透胁迫响应 ①† ②† ① ① ① ①* 李丽娟 , 任飞 , 魏鹏程 , 陈其军 , 陈珈 , 王学臣 ① 中国农业大学生物学院, 植物生理学与生物化学国家重点实验室, 北京 100193; ② 北京市农林科学院林业果树研究所, 北京 100093 † 同等贡献 * 联系人, E-mail: xcwang@ 2011-07-27 收稿, 2011-09-01 接受 国家重点基础研究发展计划(2006CB100100)、国家自然科学基金(3077019)和高等学校学科创新引智计划(B06003)资助 摘要 水孔蛋白(aquaporin, AQP)广泛参与植物的各种生理活动, 但还有许多调控机制未被发 关键词 现. 为进一步对其调控因子进行研究, 运用酵母双杂交筛选拟南芥液泡膜水孔蛋白 TIP1;1 拟南芥 (tonoplast intrinsic protein, TIP) 的互作子, 这是拟南芥中第一个被发现的液泡膜上具有高度水 渗透胁迫 转运活性的蛋白. 以AtTIP1;1 为诱饵, 筛选得到一个新的TIPs 结合蛋白, 并在酵母和植物细 液泡膜水孔蛋白 内质网 胞中验证了这种结合. 该蛋白被命名为 AtSM34, 编码一个含 309 个氨基酸的多肽, 预测分子 量为34 kD, 具有1 个单独的MYB/SANT 样结构域. AtSM34 启动子融合GUS 组织化学染色分 析显示, 其表达主要位于花、茎和叶中, 尤其是维管束组织, 并且响应渗透胁迫. AtSM34 定位 于内质网, 截断分析显示其N 端(1~83 位氨基酸)对于其定位至关重要. 过表达AtSM34 导致转 基因植物对外源甘露醇、山梨醇及脱落酸更加敏感, 表现为萌发延迟. 进一步研究发现, AtSM34 也可与AtTIP1;2 和AtTIP2;1 结合, 这2 个TIP 蛋白对液泡渗透调节发挥着重要作用, 并在种子萌发阶段大量表达. 这暗示着AtSM34 可能通过影响水孔蛋白基因的表达, 参与种子 萌发早期阶段的渗透胁迫响应. 水孔蛋白(aquaporin, AQP)是细胞膜上介导水分 调控其通道活性[7]. 热激蛋白(heat shock protein 70, 渗透调节的一类通道蛋白[1], 对植物生长发育发挥重 Hsp70)可与 AQP2 互作, 并在鼠肾细胞中调控其转 要作用. 水孔蛋白的调节及其综合功能的发挥对于 运[8]. 植物中的研究发现, 黄瓜花叶病毒(Cucumber [2] 胁迫条件下保持水分平衡具有重要作用 . mosaic virus, CMV)1a 可与拟南芥的TIP1 和TIP2 存 水孔蛋白的活性可被多种因素所调控, 包括磷 在互作, 并可能通过互作来调控 CMV 在液泡膜上的 酸化、异聚化、pH 、Ca2+ 、温度以及溶质浓度等, 调 复制[9]. 大豆胞质内的谷氨酸盐合酶可与 NOD26 的 节其开闭方式[3~6]. 最近有研究发现, 一些膜结合蛋 C 端相互作用, 对促进氮源的高效吸收固定、阻止氨 白或细胞质蛋白可通过与水孔蛋白的互作,