显微拉曼光谱法定量检测碳氧血红蛋白饱和度.pdfVIP

2012 年 第 57 卷 第 14 期： 1222 ~ 1226 《中国科学》杂志社 论 文 SCIENCE CHINA PRESS 显微拉曼光谱法定量检测碳氧血红蛋白饱和度 ① ①* ① ② 张平丽 , 孟耀勇 , 肖军 , 廖昱博 ① 华南师范大学生物光子学研究院光子中医学实验室, 激光生命科学教育部重点实验室, 广州 510631; ② 赣南师范学院物理与电子信息学院, 赣州 341000 * 联系人, E-mail: yaoyongmeng@ 2011-11-11 收稿, 2012-01-04 接受 国家自然科学基金和广东省中医药局项目(2008233)资助 摘要 采用显微拉曼光谱技术对不同饱和度碳氧血红蛋白(HbCO)进行测定, 通过偏最小 关键词 二乘法(PLS)和间隔偏最小二乘法(IPLS)建立模型, 得出线性回归方程. 结果表明, 经过筛 拉曼光谱 选变量信息所建立的间隔偏最小二乘模型(IPLS), 当血红蛋白系列样品中碳氧血红蛋白含 碳氧血红蛋白 量为0~100% 时, 线性相关系数的平方为0.99, 检测限为5.37%, 完全能满足临床和法医学 氧合血红蛋白 一氧化碳 上CO 中毒程度的检测. 此方法具有快速、简便、直接、对样品无损等优点, 有望成为检 偏最小二乘法 测碳氧血红蛋白饱和度的新方法. 间隔偏最小二乘法 一氧化碳(CO)与血红蛋白的亲合力比氧与血红 它在体液尤其是血液检测中有很大的应用潜力[10]. 蛋白的亲合力高200~300 倍, 所以一氧化碳极易与血 本文采用显微拉曼光谱结合偏最小二乘法来预测碳 红蛋白结合, 形成碳氧血红蛋白(HbCO), 使血红蛋 氧血红蛋白饱和度, 获得了更高质量的碳氧血红蛋 白丧失携氧的能力和作用, 造成组织窒息. 严重程度 白的拉曼光谱. 本法具有测定简单、操作方便、不损 与碳氧血红蛋白的饱和度呈比例关系. 正常人血液 坏样品的优点, 可用于碳氧血红蛋白饱和度的定量 中碳氧血红蛋白含量可达 5%~10%, 当其饱和度达 检测. 10%~20%时会出现头痛、无力、眩晕、劳动时呼吸 困难; 饱和度达 30%~40% 时症状加重; 当饱和度 1 实验 50% 时, 可造成死亡. 目前, 检验血液中碳氧血红 蛋白饱和度的方法主要有化学法, 包括氢氧化钠法、鞣 1.1 仪器试剂 酸试验, 一般用于饱和度达到 20% 以上的定性分析. 采用 Renishaw 公司的共焦显微拉曼光谱仪. 配 而氯化钯试验法具有灵敏度高的特点, 但专属性差. 有 20×莱卡显微物镜(数值孔径 0.35), 光谱分辨率 [1~3] [4] 1 1 另外还有分光光度法 、导数光谱法 、气相色谱 1 cm , 光谱测量可重复的准确度优于 0.2 cm , 激 法和气相色谱-质谱联用法[5,6]等. 但这些方法操作复 发波长514.5 nm, 到达样品的功率约为 1.5 mW. 杂, 费时且会损伤样品.