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人类疾病动物模型的制作 王 芳 wangf@lzu.edu.cn 动物模型的制作 1.查找文献并咨询动物实验所需动物和条件是否可行，了解前人所积累的经验，避免低水平的重复或缺乏科学依据的盲动所造成人力物力的浪费； 2.从动物品种品系、年龄、性别、体重、生物学特点、动物微生物污染级别等方面选取最可比拟的动物，不可认为选越高级动物可比性越高。 基本病理过程动物模型复制方法 水和电解质紊乱：给家兔耳缘静脉注射5%氯化钾1ml/kg，剂量依次递增。描记心电图，测量血钾浓度。 酸碱平衡紊乱： 复制急性呼吸性酸中毒模型（用止血钳夹闭气管插管的2/3，持续10分钟，测动脉血气指标。） 复制急性代谢性酸中毒模型（耳缘静脉注射5%的乳酸1ml/mim） 复制代谢性碱中毒模型（耳缘静脉注射5%的碳酸氢钠10ml/kg） 发热：大肠杆菌内毒素法、大肠杆菌法、伤寒杆菌内毒素法 弥漫性血管内凝血：用幼犬或家兔，静脉注射10%高分子右旋糖酐(40万-50万U)15ml/kg在3分钟内注入、纤维蛋白原90mg/kg。给药后的20分钟、40分钟、60分钟分别采血查Hb、RBC、BPC、PT、TT、KPTT和纤维蛋白原。 休克：失血性休克（家兔、放血法） 感染性休克（大鼠、尾静脉注射内毒素） 肿瘤疾病模型的复制 （1）自发性肿瘤模型是指利用实验动物本身某种自发肿瘤发病率高所建立的动物模型，如利用AKR小鼠建立白血病模型、利用C3H小鼠建立乳腺癌模型。 优点：自发性肿瘤通常比用实验方法诱发的肿瘤与人类所患的肿瘤更为相似，有利于将试验结果推用到人；这一类肿瘤发生的条件比较自然，有可能通过细致观察和统计分析而发现原来没有发现的环境致癌因子。 缺点：肿瘤的发生率参差不齐，不可能在短时间内获得大量的肿瘤学材料，观察时间长，实验消耗大。 某个近交系动物在一定年龄内，可以发生一定比率的某种自发性肿瘤。目前已培育了许多种小鼠自发肿瘤，从肿瘤发生学上看，这些自发瘤与人体肿瘤相似。 AKR小鼠－－→白血病，出生后1.5年90%的发病率 C3H小鼠－－→乳癌，繁殖雌鼠100%发病率 A系小鼠－－→肺癌，18个月内90%发病率 （2）诱发性肿瘤模型是指对实验动物给予致癌物质、射线以及某些致病病毒而诱发各种肿瘤的动物模型。如利用二乙基亚硝胺诱发小鼠肺癌；利用甲基胆葸诱发小鼠胃癌和宫颈癌；感染小鼠白血病病毒可诱发白血病等等。 （2）诱发性肿瘤模型： 1. 方法： 原位诱发：指将致癌物直接与动物靶组织或靶器官接触而诱发该组织或器官发生肿瘤，接触方法可通过涂抹、灌注、喂养或埋置等 。 异位诱发：将与致癌物接触后的动物组织或器官埋置于该动物或另一正常动物皮下而产生的该组织或器官的肿瘤。异位诱发肿瘤具有易于观察和取材的优点。 2.诱癌物： 放射线局部照射、化学致癌物（烷化剂、亚硝胺类、芳香胺类）、生物毒素（黄曲酶毒素）、细菌（幽门螺杆菌）、肿瘤病毒感染。 举例： 1. 二乙基亚硝胺(DEN)诱发小鼠肺癌： 采用小鼠皮下注射1％DEN水溶液，每周一次，(每次剂量为56mg/kg体重，总剂量为868mg)。观察时间为100d左右。此模型诱发率约40%。若将DEN总剂量增到1176mg时，半年诱发率可达90％以上。 亚硝胺类致癌物特点：①致癌性强，小剂量一次性可致癌；②对多种动物的多个器官能致癌，甚至可通过胎盘致癌；③具有不同结构的亚硝胺有明显的器官亲和性，如：二甲基亚硝胺等对称的衍生物常引起肝癌；不对称的亚硝胺诱发食管癌. 2. 亚胺基偶氮甲苯(OAAT)诱发小鼠肝癌： 用l％OAAT苯溶液涂于动物两肩胛间皮肤上，隔日1次，每次2—3滴、一般涂100次。7个月以上诱发肝肿瘤约55％。 芳香胺及偶氮染料类致癌特点：①需要长期大量给药才能致癌；②肿瘤发生于远离作用部位（肝、膀胱等）；③明显的种属差异；④其本身不是致癌物，致癌是由于某种代谢产物的作用；⑤其致癌作用受营养及激素的影响，如：邻位氨基偶氮甲苯引起雌性大鼠的肝癌。 3. 黄曲霉素诱发大鼠肝癌： 在大鼠饲料中加入黄曲霉素，含0.011-0.015ppm，喂养6个月，诱发率达80％。 黄曲霉素的毒性很强，很小剂（1mg/Kg）可致动物死亡，致癌性很强，是化学致癌物中最强的；它能诱发多种动物从鱼到猴的肝癌。滴入气管内可引起肺磷状细胞癌。 注意事项： 1. 必须适当选择：致瘤方法、动物种系、致癌物种类与溶剂、给药剂量与途径及观察时间等尽量简便可行，有较好的