发酵饲料中各组分的测定方法概述.doc

发酵饲料中各组分的测定方法 一、饲料中概略养分的测定方法 （一）饲料中水分的测定方法 1.原理: 试样在105±2℃烘箱内，在大气压下烘干，直至恒重，逸失的重量为水分 2.仪器设备 实验室用样品粉碎机或研钵。 分样筛：孔径0.45毫米（40目） 分析天秤：感量0.0001克。 电热式恒温烘箱：可控制温度为105±2℃。 称样皿：玻璃或铝质，直径40毫米以上，高25毫米以下。 干燥器：用氯化钙（干燥试剂）或变色硅胶作干燥剂。 3.试样的选取和制备 选取有代表性的试样，其原始样量应在1000g以上 用四分法将原始样品缩减至500g，风干后粉碎至40目，再用四分法缩至200g，装入密封容器，放阴凉干燥处保存。如试样是多汁的鲜样，或无法粉碎时应预先干燥处理，称取试样200~300g，在105℃烘箱中烘15分钟，立即降至65℃，烘干5~6小时，取出后，在室内空气中冷却4小时，称重，即得风干试样。 4.测定步骤 （1）洁净称样皿，在105±2℃烘箱中烘1小时，取出在干燥器中冷却30分钟（称样皿放入烤箱时应开1/3盖，冷却和称重时应盖严），称准至0。0002克，再烘干30分钟，同样冷却，称重，直至两次重量之差小于0。0005克为恒重。 （2）用已恒重称样皿称取两份平行样，每份2.0克，样品厚度4毫米以下，准确至0。0002克，不盖称样皿盖（或半盖），在105±2℃烘箱中烘烘4小时，以温度到达105℃开始计时，取出盖好称样皿盖，在干燥器中冷却30分钟，称重。 （3）再同样烘干1小时，冷却，称重，直至两次称重之重量差小于0.002克。 5.测定结果的计算 计算公式：水分（%）=（W1—W2）/（W1—W0）×100% 式中：W1—105℃烘干前的试样及称样皿的重量（g）； W2—105℃烘干后试样及称样皿的重量（g）； W0—已恒重的称样皿的重量（g）。 6.重复性 每个试样，应取两个平行样进行测定，以其算术平均值为结果，两个平行样测定值相差不得超过0。2%，否则重做。、 7.注意事项 （1）如果试样进行过预先干燥处理，应按下式计算原来试样的所含水分总量： 原试样总水分（%）=预干燥减重（%）+[100—预干燥减重（%）] ×风干试样水分（%） （2）某些含脂肪高的样品，烘干时间长反而增重，乃脂肪氧化所致，应以增重前那次重量为准。 （3）含糖分高的易分解或易焦化试样，应使用减压干燥法（70℃，600mm汞柱以下，烘干5小时）测定水份。 （二）饲料中粗蛋白的测定方法 1.测定原理 在催化剂（如硫酸铜、硫酸钾、硫酸钠或硒粉）作用下，试样中有机物质被浓硫酸消化分解，使含氮物质（蛋白质，氨态氮等）转化为硫酸铵，而非含氮物质则以二氧化碳、水蒸气、二氧化硫等气态逸出。消化液在强碱作用下蒸馏，释放出氨气，氨气冷凝后被硼酸吸收，并与其结合成硼酸铵，然后以甲基红-溴甲酚绿作混合指示剂，用盐酸标准滴定溶液滴定，求出氮的含量，再乘以一定的换算系数（通常用6.25计算），即得出试样中粗蛋白质的含量。 2.试剂和材料 未特殊标注的试剂均为分析纯。水至少应为蒸馏水 （1）浓硫酸：化学纯。 （2）400g/L氢氧化钠溶液：40.0 g氢氧化钠(化学纯)，溶于100.0 mL水中。 （3）混合催化剂：取质量比为1:9的五水合硫酸铜(预处理：研磨至粉末状)和无水硫酸钾混合并研磨混匀，装入试剂瓶中密封备用。 （4）1 g/L甲基红乙醇溶液：称取0.10g甲基红溶于100 mL乙醇中，棕色瓶中保存3个月。 （5）1 g/L溴甲酚绿乙醇溶液：称取0.10g溴甲酚绿溶于100 mL乙醇中，棕色瓶中保存3个月。 硼酸吸收液：溶解2.0g分析纯硼酸于100.0ml容量瓶中，加蒸馏水至100.0ml，摇匀备用。 0.05mol/L盐酸标准滴定溶液：4.2ml盐酸注入1000 mL水中，用无水碳酸钠法标定。 （8）蔗糖：分析纯。 （9）硫酸铵：基准试剂。 3.仪器设备 （1）实验室用粉碎机。 （2）分样筛：40目（孔径0.42 mm）。 （3）分析天平：感量 0.0001 g。 （4）消煮炉或六联电炉：6×（800~1000） （5）凯氏定氮仪：FOSS Kjeltec 8100。或半微量凯氏定氮仪：如图 （6）酸式滴定管：25.0ml或50.0ml （7）凯氏烧瓶：100.0ml （8）烧杯：250.0ml （9）三角瓶：150.0ml （10）容量瓶：100.0ml （11）移液管：10.0ml （12）量筒：10.0ml、25.0ml 4.分析步骤 （1）消化 精确城区饲料样本0.5000~1.0000g，将秤样纸卷成桶状，无损的移入100.0ml洗净、烘干的已编号的凯氏烧瓶中，加入1.0~1.5g混合催化剂，沿着凯氏烧瓶壁加入10.0~15.0ml浓硫酸，将凯氏烧瓶放于毒