非标记液晶型免疫传感器检测赭曲霉素A.pdfVIP

V01．32 高等学校化学学报 No．5 2011年5月 CHEMICAl。JOURNAl。OFCHINESEUNIVERSllIES 1065一1069 非标记液晶型免疫传感器检测赭曲霉素A 杨胜园1’2，谭 慧1，刘艳梅1，吴朝阳1，沈国励1，俞汝勤1 (1．湖南大学化学生物传感与计量学国家蕈点实验室，长沙410082； 2．南华大学公共卫生学院卫化检测教研室，衡阳421001) 摘要研制了一种基于液晶取向改变的非标记液晶型免疫传感器，并用于检测赭曲霉素A(OTA)．采用戊二 醛交联法将OTA同定在由自组装膜修饰的玻璃肇底表面．自组装膜能诱导液晶分子垂直排列，而连接OTA 抗体后则扰乱了液晶分子取向的有序排列。导致液晶分子在化学敏感膜表面的取向发生变化．使光学信号 的亮度及色彩发生变化．以此实现对OTA的检测．当OTA含量超过0．0lns／mL时，光学信号发生明显变 化．本方法具有灵敏度高、特异性好、非标记和操作简单等特点． 关键词液晶；自组装膜；免疫传感器；赭曲霉素A 中图分类号0657．39 文献标识码A 文章编号025l旬790(2011)05．1065-05 液晶(Liquidcrystal，LC)由于兼具液体流动性和固体各向异性的独特性质而被广泛用于传感器的 研究．液晶型生物传感器利用传感器检测目标化合物反应前后液晶分子在敏感膜表面的取向变化情 况一。，液晶折射光线能力的改变导致传感器的颜色和光亮度发生变化，从而实现对牛物分子的检 蛋白质【6’川、多肽旧1及有机磷‘9j等物质的检测．液晶型生物传感器的构造简单．无需特殊光源，用常规 的载玻片即叮构建，具有简便、轻巧的特点；同时叮通过光学信号的变化及时提供化学牛物反应信息， 易于实现传感器的微型化和阵列化，在生命科学、临床医学和食晶检验等领域具有广阔的应用前景． 赭曲礴素A(Oehratoxin A，OTA)是曲霉属和青霉属某些菌株的次级代谢产物，广泛存在于各种农 产品中，可经食物链进人人体，对人类生命健康造成危害一…．研究结果表明．OTA不仅具有免疫毒 性、肾毒性和肝毒性，还有致畸、致突变和致癌性¨1|． 本文结合液晶传感器的优点，基于竞争免疫反应原理，在自组装膜修饰的玻璃肇底表面以OTA小 分子抗原为模型，观察结合目标生物分子前后液晶分子取向的改变所引起的光学信号的变化，构建了 用于检测小分子抗原的液晶传感器． 1 实验部分 1．1仪器与试剂 TK．C102l XP-700偏光显微镜(上海长方光学仪器有限公司)；JVCEc数码摄像机；网刚影像采集 水接触角测垣仪(上海中晨数字技术设备有限公司)；玻片(扬州三月玻璃制品有限公司)；Mylar聚酯 片(广州舒歌电子有限公司)． 收稿Ij期：2010．．06-30． 联系人简介：吴朝阳．男．博士．教授．博士生导师．主要从事化学与生物传感器研究．E-mail：zywu@hnu．edu．cn 万方数据 1066 高等学校化学学报 V01．32 (5CB)购自河北华晶科技开发有限公司；其它试剂均为分析纯． 1．2玻片的清洗与组装 将玻片切割成2cm×2 h．再分别用乙醇和去离子水清洗干净，经氮气吹干，于110oC烘烤3h，备用． 常温下静置20min，用超纯水冲洗干净，于100oC烘烤1h，备用．下玻片用APTES和DMOAP混合溶 mmol／L醋 液组装：将清洗烘烤后的玻片浸入1％(体积分数)APTES和l％(体积分数)DMOAP的10 h，用超纯水冲洗干净，于llO℃烘烤1h，备用． 酸．醋酸钠溶液中(pH=5．0)，于80℃恒温1．5 1．3偶联物的制备 向200斗L含0．5mgOTA的体积分数为25％的乙醇溶液中