大学教程DNA的生物合成资料.pptVIP

第八章 核酸的生物合成 中心法则(Central dogma)  目 录 第一节 DNA的生物合成 第一节 DNA的生物合成 五、 DNA连接酶(DNA ligase) 原核细胞DNA的半不连续复制复制过程 复制叉处前导链和随后链同时合成的工作模型 DNA的复制过程： 复制的终止 原核生物复制终止 真核生物复制终止 真核和原核DNA细胞复制比较 一）基因突变的意义 DNA紫外线损伤的光裂合酶修复 五、逆转录现象和逆转录酶 逆转录酶（reverse transcriptase）又称为反转录酶，为依赖RNA的DNA聚合酶 (RNA-dependent DNA polymerase, RDDP) 2. 逆转录与癌变 致癌病毒多数是RNA病毒，少数是DNA病毒，致癌病毒感染宿主细胞后，致癌基因由病毒基因整合到宿主细胞的染色体中，致癌基因可表达成蛋白质，此蛋白使正常细胞转变为癌细胞。致癌病毒已证实40余种致癌基因，已知20种以上的 逆转录病毒致癌基因. 有相应的正常细胞基因，称作细胞原癌基因（c-onc），它们只有在特定条件下，才引发癌变。 这些致癌基因按其蛋白质产物可分以以下五类： 1.src 家族:10余种基因,表达酪氨酸蛋白激酶类; 2.ras 家族:多种表达信息传递蛋白质基因,G蛋白; 3.myc家族:数种表达DNA结合蛋白基因,起转录调控; 4.sis家族:致癌基因是为生长因子编码的基因; 5.erb 家族:四种表达细胞骨架蛋白质基因,与细胞形态和运动有关。 致癌基因的发现，使肿瘤发病机制的研究深入到分子水平，而有关致癌基因在什麽情况下才会表达成癌细胞，将是一个十分重要的课题。 3.重组修复 RecA DNA pol 切除修复 57/62 4. SOS修复：DNA分子多处受到较大范围的损 伤，细胞所作出的一系列反应。 细胞能继续生存，但引起DNA较长期的广泛的突变。 后果： SOS修复系统：Uvr类，Rec类，DNA pol，LexA等 组成调节子（regulon）网络系统。 特点：抑制细胞分裂，允许大量快速的切除修 复和重组修复， 允许损伤的DNA作为模 板进行复制，对碱基选择性低等。 58/62 以RNA为模板，dNTP为原料，按碱基配对规律合成DNA的过程，由逆转录酶催化。 逆转录现象 59/62 逆转录酶是多功能酶，有三种酶活性： 1. 逆转录活性：即以RNA为模板合成DNA 2. RNase活性：水解RNA:DNA中的RNA 3. DNA pol活性：以DNA为模板合成DNA 60/62 RNA模板 逆转录酶的逆转录活性 逆转录酶的RNase活性 RNA:DNA杂化双链 单链DNA 逆转录酶的DNA pol活性 整合(integration)入细胞基因组 双链DNA 病毒基因组通过基因重组插入到宿主细胞基因组中，称为整合。 tRNA引物 61/62 逆转录及逆转录酶的生物医学意义 1. 丰富和发展了中心法则 2. 丰富和发展了致癌理论 3. 在基因工程中的应用 RNA也可作为遗传信息的载体 RNA在进化中可能比DNA更原始 癌基因与病毒致癌理论 逆转录酶广泛应用于基因工程中 逆转录病毒是基因治疗的常用载体 62/62 复制的起始 (一)DNA解成单链 由特定蛋白质识别复制起始位点（ori），在解螺旋酶、TOPO酶及单链DNA结合蛋白的共同作用下，DNA解链，解旋，形成复制叉。 30/62 ? 倒Y E.coli复制起始点oriC跨度为245bp，有3组串联重复序列和2对反向重复序列。 GATTNTTTATTT…GATCTNTTNTATT…GATCTCTTATTAG 串联重复序列 反向重复序列 …TTTGGATAA…..TTATCCACA AATAGGT--T TGTGGATTA……TTATACACA… A--TA--GTGT 31/62 回文结构 AGCT TCGA (二)引发体的生成 解螺旋酶解开双链后引物酶进入形成引发体。 5′ 3′ 3′ 5′ 引物酶 DnaC 引发体 解螺旋酶 32/62 （三） RNA引物的合成 33/62 5′ 5′ RNA引物 5′ 3′ 5′ 3′ 小节 参与复制起始的成员 名称 功能 DnaA蛋白 辨认起始点 解螺旋酶（DnaB，Rep）解开DNA双链 DnaC 协助解螺旋酶 引物酶（DnaG