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第二章工业发酵培养基及制备资料.ppt
概述 配制工业发酵培养基的一般要求 配制工业发酵培养基的一般要求 第一节 培养基的成分 常用的碳源有:糖类、油脂、有机酸、低碳醇和碳氢化合物。 一、 碳源: (一)糖类:单、双、多糖。淀粉的水解是在热水中膨胀,然后用酶或酸水解。 葡萄糖是碳源中最易利用的糖,常作为培养基的主要成分。 (二)油脂:一般在糖类缺乏时,菌体可利用脂肪。脂肪酸→乙酰CoA→三羧酸循环→产生大量能量→耗氧→丙酮酸→乳酸。 霉菌和放线菌可以用油脂作碳源。 第二节 培养基的成分 (三)有机酸,醇,柠檬酸,甲醇。 (四)碳氢化合物:石油产品,如谷氨酸生产菌,用正十六烷作碳源,当发酵到100小时加适量青霉素,谷氨酸产量达84 g/L。 碳源可分为速效碳和缓效碳,要配合使用。 七、消沫剂 工业发酵中常用一些消沫剂消除发酵中产生的泡沫,防止逃液和染菌,保证生产的正常进行。 消沫剂一般采用表面活性物质,当泡沫的表面存在有极性表面活性物质形成的双电层时,加入另一种极性相反的表面活性物质,可以中和电性,破坏泡沫的稳定性,使泡沫破碎;或者加入更强极性的物质与发泡剂争夺泡沫表面上的空间,引起力的不平衡,促使泡沫破碎。 常用的消沫剂:天然油脂、聚醚类、高级醇、脂肪酸等 第三节 培养基的种类和配方设计 液体培养基:常用于大规模的工业生产 固体培养基:用于菌种的培养和保存。是在液体培养基中加入凝固剂配成的,最常用的凝固剂是琼脂。 半固体培养基:用于菌种鉴定、细菌运动观察和噬菌体效价滴定。 分类:斜面试管、平板等 固体培养基在菌种的分离、保藏、菌落特征的观察、活菌计数和鉴定菌种方面是不可缺少的。 孢子培养基 用途:供制备孢子用。 要求:能使孢子迅速发芽和生长,能形成大量的优质孢子,但不能引起菌种变异。 注意事项:基质浓度(特别是有机氮源)要低些,无机盐浓度要适量。 孢子培养基成分因菌不同而异,常用的有麸皮培养基、大(小)米培养基、琼脂斜面培养基等。 种子培养基 种子培养基特点: 1.必须有较完全和丰富的营养物质,特别需要充足的氮源和生长因子。 2. 种子培养基中各种营养物质的浓度不必太高。供孢子发芽生长用的种子培养基,可添加一些易被吸收利用的碳源和氮源。 3. 种子培养基成分还应考虑与发酵培养基的主要成分相近。 发酵培养基 用途:供菌体生长繁殖和合成大量代谢产物用的。 要求:营养成分和粘度适中,同时考虑各种生化代谢过程,产物合成期pH值等条件不易发生大的变动,也不能影响产物的分离提纯。 二、培养基的设计 第三节 影响培养基质量的因素 第四节 影响培养基质量的因素 油脂:原料(豆油、玉米油、米糠油、杂鱼油)以及储藏条件和时间的影响 无机盐和前体物 灭菌的影响 工业发酵中常采用饱和蒸汽灭菌方法杀灭培养基中的有机体。 糖类(还原糖)与氨基酸(赖氨酸)、肽类或蛋白质等有机氮源一起加热,会产生化学反应,形成5-甲基糠醛和棕色的类黑精; 糖类还能与磷酸盐产生络合反应,形成棕色色素; 措施:将糖与其他物质分别灭菌 四、其它影响因素 培养基的pH对微生物的生长和代谢产物的合成有较大的影响。pH偏高或偏低在灭菌过程中有可能加速营养成分的破坏。 黏度对发酵水平有一定的影响。如采用淀粉、黄豆饼粉、玉米粉、花生饼粉等配置的培养基,由于固型颗粒的存在和黏度的增加影响了灭菌的质量。 * * 第二章 工业发酵培养基及制备 第一节 培养基的成分 第二节 培养基的类型和配方设计 第三节 影响培养基的质量的因素 培养基是人们提供微生物生长繁殖和生物合成各种代谢产物所需要的按一定比例配制的多种营养物质的混合物。 返回 谷氨酸生产培养基(%): 水解糖12 玉米浆0.3 尿素0.5 磷酸氢二钾0.1 硫酸镁0.04 青霉素0.01g/L 返回 青霉素发酵培养基(%): 葡萄糖10 硫酸铁0.01, 玉米浆4 硫酸锰0.01 苯乙酸0.5 硫酸锌0.01。 猪油0.5 返回 1.?营养比较丰富,浓度要恰当:太营养菌体生长过盛,否则生长太差. 2.?原料彼此不能产生化学反应:如柠檬酸,CaCO3
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