促红细胞生成素视网膜神经元缺氧损伤保护作用的体外研究.pdf

Y908788 中文摘要 促红细胞生成素对视网膜神经元缺氧损伤保护作用的体外研究 中文摘要 目的：研究如何使视网膜神经细胞避免损伤或死亡即神经保护，是眼科学基础 中枢神经系统的损伤后的生存、修复及预后有明显保护作用。本实验建立新生大鼠 视网膜神经元细胞原代混合培养体系和Mnller细胞传代培养体系，分析EP0及EP0 受体在正常视网膜神经元细胞以及低氧诱导时的表达，观察缺氧损伤对培养的视网 膜神经元的影响，并探索EPO对神经元损伤的保护作用及机制，为EP0在视网膜疾 病中的应用奠定理论基础。 方法：将wistar乳鼠视网膜通过胰蛋白酶+依地酸(EDTA)消化，制成视网膜 单细胞悬液，建立一种稳定、可靠的视网膜神经元体外培养体外培养的方法，并用 免疫细胞化学技术对视网膜神经元进行鉴定。低浓度氯化钴预处理对视网膜神经元 进行低氧预适应，之后制作细胞急性缺氧模型。MTT检测评价视网膜神经元急性缺氧 损伤和低氧预适应后细胞的活力改变。采用反转录．PcR(RT—PcR法)、免疫细胞化 学方法检测EP0及E