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光皮桦木质部cDNA-AFLP技术体系的建立及应用.pdf
第35卷摇 第6期 北 京 林 业 大 学 学 报 Vol.35,No.6
2013年11月 JOURNAL OF BEIJING FORESTRY UNIVERSITY Nov. ,2013
光皮桦木质部cDNA鄄AFLP技术体系的建立及应用
江摇 成摇 林二培摇 黄华宏摇 童再康
(浙江农林大学亚热带森林培育国家重点实验室培育基地)
摘要:为了挖掘光皮桦材性相关基因,本研究以光皮桦木质部为材料,通过对RNA 的提取、cDNA 的反转录及纯化
的对比分析,以及选扩体系优化等,建立了相应的cDNA鄄AFLP体系。 结果表明:采用CTAB和RNAiso试剂相结合
的方法得到的RNA质量较好,cDNA经纯化后选扩效果明显变好。 选扩体系为:4郾0 滋L预扩产物(稀释40倍)、1郾6
2+
滋L的引物(10郾0 滋mol/ L)、0郾2 滋L 的dNTP(2郾5mmol/ L)、0郾4 滋L 的Mg (25郾0mmol/ L),以及0郾2 滋L 的Taq DNA
聚合酶(5U/ 滋L)。 进一步以来自不同木质化茎段的cDNA为模板,筛选出31对扩增效果较好的引物组合,同时分
离出一些差异表达的基因片段,经测序后探讨了其在木质化发育过程中可能的功能。
关键词:光皮桦;cDNA鄄AFLP;木质化;基因表达
鄄鄄 鄄鄄 鄄鄄
中图分类号:S718郾43摇 摇 文献标志码:A摇 摇 文章编号:1000 1522(2013)06 0048 07
JIANG Cheng;LIN Er鄄pei;HUANG Hua鄄hong;TONG Zai鄄kang. Establishment and application of
cDNA鄄AFLP technical system for xylem tissue of Betula luminifera. Journal of Beijing Forestry
鄄鄄
University (2013)35(6)48 54 [Ch,32 ref.] Nurturing Station for State Key Laboratory of Subtropical
Silviculture,Zhejiang Agriculture and Forestry University,Linan,311300,P.R.China.
To investigate genes related to wood property in Betula luminifera,a suitable cDNA鄄AFLP reaction
system for xylem tissues of B. luminifera was found in this study based on the comparative analysis of
main procedures, including RNA extraction, reverse transcription and purification, and optimizing of
selective amplification system. The results showed that CTAB method in combination with the RNAiso
reagent was appropriate for RNA isolation of xylem,and cDNA purifying was
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