色谱绪论10.ppt

第十七章 色谱分析法概论 §1、概述.色谱法的特点、分类和作用 §2、色谱过程与术语 §3 、色谱分离的塔板理论 §4、色谱分离的速率理论 §5、色谱分离的基本分离方程 §6、基本类型色谱法的分离机理 §7、色谱技术发展趋势 一、色谱法的作用、分类和特点 2 色谱法分类 3 色谱法特点 §2、色谱流出曲线与术语 当组分从色谱柱流出时，检测器对该组分的响应信号随时间变化所形成的曲线称为色谱流出曲线。 当实现良好分离时，每个色谱峰代表一个化合物成分，色谱峰的面积与该化合物的含量成正比。在理想情况之下，色谱峰形状是正态分布曲线。 （3）三种峰宽参数 （2）用流动相体积表示的保留值 （3） Kovats 保留指数Ix 例：在同一根色谱柱上测出：正庚烷，正辛烷和未知物的调整保留时间分别为14.08s，25.11s和16.32s，试计算它们的保留指数I。 解：由定义可知： I庚=100×7=700 I辛=100×8=800 由求出的保留指数与文献保留指数对照可知未知物为甲苯。 3.分配系数K和容量因子k (2)分配比 （partition ratio）k 4.容量因子k和调整保留时间的关系 色谱过程可认为是稳态过程，在色谱带前移的时间过程中，该组分所有分子分布在流动相中的量的比例不变；在整个色谱层析过程中，每个分子分布在流动相中的时间比例不变。 流动相在柱内的线速度设为Uo；组分分子在柱内的线速度设为Usamp，则： Usamp＝ Uo×色谱过程中组分分子分布在流动相中的时间比例； 对于该组分的大量分子而言，从统计角度看，组分分子分布在流动相中的时间比例=色谱过程中，组分分子分布在流动相中的量的比例。因此推得： 色谱分离过程原理小结 某成分从进样到流出分离柱，所用总时间是tR，而流动相从进样口到流出分离柱需时t0，则有： tR = t0(1+k)=t0+kt0， 其中： 5. 分离参数 ：（1）分离度 （2） 相对保留值α 例：用一根固定相的体积为0.148mL，流动相的体积为1.26mL的色谱柱分离A,B两个组分，它们的保留时间分别为14.4min，15.4min，不被保留组分的保留时间为4.2min，试计算：（1）各组分容量因子（2）分配系数（3）A、B两组分选择因子α 解： (1) k=(tr-t0)/t0 kA=(14.4min-4.2min)/4.2min=2.43 kB=(15.4min-4.2min)/4.2min=2.67 K=kVm/Vs KA=kAVm/Vs=2.43×1.26mL/0.148mL=20.7 KB=kBVm/Vs=2.67×1.26mL/0.148mL=22.7 (3) α =KB/KA=22.7/20.7=1.10 6. 吸附等温线及其与色谱峰的对称性 （2）对称因子T：描述峰的不对称性 3.有效塔板数和有效塔板高度 例：用一根柱长为1m的色谱柱分离含有A，B，C，D四个组分的混合物，它们的保留时间tR分别为6.4min, 14.4min,15.4min,20.7min,其峰底宽Wb分别0.45min, 1.07min, 1.16min,1.45min。试计算各谱峰的理论塔数。 解： 4.色谱分离的塔板理论小结 四、 速率理论（影响柱效的因素） 1. A─涡流扩散项 3. B/u —纵向扩散项（分子扩散项）。由于浓度梯度，试样组分谱带随着流动相前移时，会向谱带前后扩散，导致色谱峰变宽 4. C ·u —传质阻抗项 5. 速率理论的要点 五、 色谱分离度方程 对于被分析样品中的难分离物质对1与2，由于二者的物理化学性质很接近，故可合理认为：相邻两峰宽近似相等，即 Wb2 = Wb1=Wb，可导出下式： 影响分离度的因素 分离效果的判断 例2：在3.0m色谱柱上，分离A、B组分，其保留时间分别为14.0min、17.0min，不被保留的组分的保留时间为1.0min，B 组分的峰底宽度Wb为1.0min。计算A和B达到基线分离时（R=1.5）的柱长为多少？ 解： B组分的有效塔板数： 达到R=1.5时，需要的有效塔板数： 六、基本类型色谱法的分离机理 2. 分配色谱法 4. 分子排阻色谱法 七、色谱技术发展趋势 1. 新型固定相 2. 新型检测器 3. 新型色谱分离技术 A = 2λdp dp：固定相的平均颗粒直径 λ：固定相的填充不均匀因子 固定相颗粒dp↓，填充得越均匀，λ↓， A↓，H↓，柱效n↑，涡流扩散所引起的色谱峰变宽现象减