mmp13在关炎软骨中的表达及rnai对其抑制作用的实验研究.pdfVIP

MMPl3在关节炎软骨中的表达及RNAi对芤抑制作用的实验研究 中文摘要 中文摘要 第一部分：大鼠佐剂性关节炎模型中 目的研究大鼠佐剂性关节炎模型中爪部跖趾关节及膝关节的软骨及滑膜中 的MMP3、MMP9，MMPl3及TIMP-I在不同肘期的表达情况。 方法制作大鼠佐剂性关节炎模型25只，分别于造模第l，2，5，7，9周各处 死5只．取注射足(患爪)的跖趾关节和同侧膝关节的软骨及邻近滑膜，用反转录 表达，同时取患侧爪部跖趾关节和膝关节软骨行病理切片检查。 结果造模第l、2周，患爪的软骨及滑膜中MMP3、MMPl3均有表达，且在 第7周才测到表达，MMP9表达不稳定．膝关节可以测到啪一l，各时间段均未 可见炎性反应，患爪和膝关节的软骨无明显改变． 结论·在大鼠佐剂性关节炎模型早期，患爪的跖趾关节滑膜和软骨可以检测到 关系紊乱可能在软骨破坏过程中起重要作用．但是患爪和膝关节无骨组织，软骨 破坏，说明MMP对软骨胶原及基质的降解是一个长期过程。 关键词：佐剂性关节炎；基质金属蛋白酶；金属蛋白酶组织抑制剂一l； 第二部分MMPl3在兔膝关节创伤性骨性关节炎 软骨细胞中表达的实验研究 达。 丛竺!!!查羞堇壅塾量±盟塞垄墨墨型笪型基塑型堡旦塑壅墅塑壅 生塞塑重 cruciate 方法将5只大白兔行单侧膝关节前交叉韧带切除术(anteriorligament 后，取膝关节滑膜组织培养滑膜细胞，另取部分手术侧膝关节软骨做透射电镜检 查，剩余软骨消化后，用RT-PCR和免疫组化法检测软骨细胞中的aggrecan、 MMPl3、Ⅱ型胶原、X型胶原的mRNA和MMPl3的蛋白表达． 结果造模两周后大体观察见膝关节软骨破坏，透射电镜下可见软骨细胞细胞 器溶解，胶原纤维网稀疏。滑膜细胞未能够传代培养．手术侧膝关节软骨细胞可 MMPl3蛋白的表达阳性，假手术侧无MMPl3和蛋白的表达． 结论第二周时兔膝关节创伤性骨性关节炎模型软骨细胞中有II型胶原、 关键词：基质金属蛋白酶13：兔；OA；软骨细胞： ’ 第三部分MMPl3在骨性关节炎患者滑膜细胞中表达的研究 方法取临床上确诊为膝关节骨性关节炎的患者的滑液培养滑膜细胞，经形态 表达． 测到MMPl3的mRNA表达，片断大小和引物设计相一致。 结论骨性关节炎患者滑膜细胞中有MMPl3的mRNA表达。 关键词：基质金属蛋白酶13；骨性关节炎；滑膜细胞； ^ 第四部分RNAi抑制兔创伤性骨性关节炎中MMPl3表达的实验研究 达。 方法体外化学合成MMPl3序列特异性双链RNA与脂质体混合后转染OA模型 Ⅱ MMPl3在关节炎软骨中的表达及RNAi对其抑制作用的实验研究 中文摘要 的表达。MTT法检测各组的软骨细胞生长情况． 对照组明显减少．与对照组比较，非特异性组、siRNA组、脂质体组软骨细胞的 存活率显著降低(肛O．05)，但在三组间两两无显著性差异． 结论使用RNA干扰技术可有效抑制兔OA模型中膝关节软骨细胞MMPl3 的表达，RNA干扰技术为基因治疗OA提供了新策略． 关键词：RNA干扰；基质金属蛋白酶13；兔；OA； ^ 尽≯ 作 者：夏睿 指导老师：董启榕教授 in MMPl3在关节炎软骨中的表达及RNAi对薮抑制作用的实验研究