膀胱肿瘤rasf1a基因家族启动子高甲基化状况研究.pdf

中文摘要 中文摘要 甲基化是研究最为深入的表观遗传学机制。该机制的异化可导致基因表达的 异常及基因组稳定性的降低，继而促进肿瘤发生和发展。启动子CpG岛的高甲 基化已被认为是与遗传性缺陷同等重要的、造成抑癌基因在肿瘤中失活的分子 PCR。 生物学机制。我们早期的实验使用甲基特异性eCR(methylationspecific MSP)检测膀胱肿瘤RASSFIA基因甲基化，虽然表明两者存在一定关联，但临床 诊断意义不高。本研究拟从以下两个方面探索提高膀胱肿瘤标本RASSFIA基因 甲基化临床诊断意义的途径。 一，改变退火温度对甲基特异性PCR检验指标有效性的影响。目的：探讨改 变退火温度对甲基特异性PcR检验指标有效性及诊断意义的影响。方法：将经 测序证实的RASSFIA完全甲基化标本作为100％M标本，完全未甲基化标本作为 096M标本，按I：3体积比例混合，作梯度PCR扩增，摸索适当的退火温度。选取 单一电泳条带的温度为优化的退火温度，并以这些温度检测70例标本(35对， 以同一病人的肿瘤组织K、癌旁组织N为一对)，比较其