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二.基因表达运载体的构建(核心步骤) (1)目的:使目的基因在受体细胞中__________,并且可以__________,使目的基因能够__________。 (2)组成:__________+__________+__________+__________ 1.报道称深圳某生物制品公司将人的乙肝抗原基因导入酵母菌,生产出的乙型肝炎疫苗,致使婴儿接种后发生疑似预防接种异常反应,并已出现死亡病例。下列关于此乙肝疫苗的说法正确的是A.乙肝抗原基因可从酵母菌基因文库中获得B.转基因酵母菌生产乙肝疫苗的理论基础之一是生物共用一套遗传密码C.转基因过程中用到的质粒是一种类似于染色体上链状DNA的遗传物质D.将乙肝抗原基因导入酵母菌时用CaCl2处理酵母菌,可增大细胞膜的通透性 2.某线性DNA分子含有5000个碱基对(bp),先用限制性核酸内切酶a完全切割,再把得到的产物用限制性核酸内切酶b完全切割,得到的DNA片段大小如下表。限制性核酸内切酶a和b的识别序列和切割位点如下图所示。下列有关叙述错误的是( ) A.a酶与b酶切断的化学键相同?? B.限制性核酸内切酶a和b切出的DNA片段不能相互连接 C.该DNA分子中a酶能识别的碱基序列有3个 D.仅用b酶切割该DNA分子至少可得到三种DNA片段 3.金茶花是中国特有的观赏品种,但易得枯萎病。科学家在某种植物中找到了抗枯萎病的基因,通过下图所示的方法培育出了抗枯萎病的新品种。相关叙述正确的是( ) A.图中①②在基因工程中依次叫做基因表达载体、目的基因 B.形成③的操作中使用的酶有限制酶、DNA聚合酶和DNA连接酶 C.由④培育至⑤过程为植物组织培养 D.在⑤幼苗中检测到抗枯萎病基因标志着成功培育新品种 5.科学家想用农杆菌转化法将某外源高产基因转移到大豆细胞中,以获得高产大豆,其培育过程如图所示。据图回答下列问题。 (1)利用 技术可以对外源高产基因进行扩增。土壤农杆菌Ti质粒 上含有T—DNA,可将外源高产基因整合到大豆细胞的 上。 (2)构建含高产基因的重组质粒(基因表达载体)的过程中需要的工具酶 有 。这个基因表达载体的组成,除了外源高产基因外,还必须 有 以及标记基因等。 (3)用含有重组质粒的土壤农杆菌去感染大豆细胞,如果要检测外源高产 基因是否成功导入大豆细胞中可采用 技术;如果要检测外源高 产基因在大豆细胞中是否成功表达可采用 技术。 (4)含高产基因的大豆细胞需要经过 过程才可能获得高产大豆植株,该过程依据的原理是 。 6.科学家从某耐盐植物中得到耐盐基因(R),培育出 耐盐转基因农作物。回答下列问题: (1)在基因工程中,耐盐基因(R)被称为 。 (2)如果用农杆菌转化法将R基因导人农作物 细胞,应先将R基因插入农杆菌的 中,然 后用该 农杆菌感染农作物细胞,将R基因插入 农作物细胞的 上。 (3)上述过程中用到的DNA连接酶分为两类,其中T4DNA连接酶既能 连接双链DNA分子片段的 __, 也能连接 ____。DNA连接酶的功 能是连接两个脱氧核苷酸之间的 ____。 (4)若得到的耐盐转基因农作物的基因类型有甲、乙两种,R基因的整 合位点如图(只考虑其中的两对 染色体,R基因都能正常表达)。让植 株自花传粉(植株的减数分 裂正常,且不考虑交叉互换),会产生含两 个R基因配子的植株为图 类型;若子代耐盐植株所占比例为 100%,则R基因的 整合位点属于图 类型。 7.科学工作者欲培育能产生含铁量较高的转基因水稻新品种,应该选择图中③④表示的途径最为合理可行,具体步骤如图所示: ①若铁结合蛋白基因来自菜豆,利用菜豆细胞内形成的mRNA通过逆转 录过程形成cDNA,将这些cDNA用限制酶处理后储存在受体菌群体内, 这些受体菌群被称为菜豆的_________。 ②将重组Ti质粒转入农杆菌时,可以用_________处理农杆菌,使重组 Ti质粒易于导入。将含有重组Ti质粒的农杆菌与水稻愈伤组织共同培养 时,通过培养基2的筛选培养,可以获得导入成功的受体细胞,该筛选过程是通过在培养基2中加入_________实现的。 ③所得含铁量较高的转基因水稻新品种与野生水稻属于同一物种,原因是它们无_______。 8.图①表示含有目的基因D的DNA片段长度(bp即碱基对)和部分碱基序列,图② 表示一种质粒的结
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