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异源表达Peu-miR473a增强拟南芥的抗旱性.pdf
第37卷摇 第5期 北 京 林 业 大 学 学 报 Vol.37,No.5
2015年5月 JOURNAL OF BEIJING FORESTRY UNIVERSITY May,2015
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DOI:10.13332/ j.1000 1522
异源表达Peu鄄miR473a 增强拟南芥的抗旱性
李摇 岚摇 王厚领摇 赵摇 琳摇 赵摇 莹摇 李惠广摇 夏新莉摇 尹伟伦
(北京林业大学林木育种国家工程实验室)
摘要:为了探究胡杨miR473a基因的功能,本文克隆了miR473a 的前体Pre鄄Peu鄄miR473a,并利用农杆菌花序侵染法
将其遗传转化入拟南芥。 通过普通PCR和茁鄄葡萄糖苷酸酶(GUS)组织化学染色检测获得 CaMV35S:miR473a过
表达植株,然后对转基因和野生型植株在甘露醇模拟高渗环境与土壤自然干旱条件下的生长状况及各项生理指标
进行评价。 结果表明,胡杨miR473a前体长度为100bp,与毛果杨前体序列相似度为100%,可以形成完美的二级
茎环结构。 相比于野生型,过表达胡杨miR473a 的拟南芥在200mmol/ L甘露醇胁迫条件下的萌发率、根长和生长
状况都优于野生型;在土壤干旱处理条件下,转基因拟南芥的株高、相对含水量、脯氨酸含量以及光系统域(PS域)
最大光合效率均显著高于野生型10%以上(P0郾05)。 半定量PCR检测显示:Peu鄄miR473a参与胡杨受干旱胁迫
的正调控,杨树中预测的靶基因Potri.012G093900、Potri.007G100200、Potri.009G165300、Potri.004G204400 受干旱
胁迫的负调控;拟南芥中预测的靶基因AT1G24530、AT5G45000、AT5G46070及AT3G52950在转基因株系中表达量
下降。 初步预测它们有可能被miR473a靶向调控。 本研究表明,miR473a基因在干旱胁迫条件下通过调控植株的
抗脱水能力和渗透调节能力发挥一定抗旱作用。
关键词:miR473a;胡杨;遗传转化;拟南芥;抗旱性
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中图分类号:S792郾119;Q943郾2摇 摇 文献标志码:A摇 摇 文章编号:1000 1522(2015)05 0030 10
LI Lan; WANG Hou鄄ling; ZHAO Lin; ZHAO Ying; LI Hui鄄guang; XIA Xin鄄li; YIN Wei鄄lun.
Heterogeneous expression ofPeu鄄miR473a gene confers drought tolerance inArabidopsis thaliana.
鄄鄄
Journal of Beijing Forestry University (2015)37 (5) 30 39 [Ch,47 ref.] National Engineering
Laboratory for Tree Breeding,Beijing Forestry University,Beijing,100083,P. R. China.
In order to study the function of miR473a in Populus euphratica, we cloned the precursor of
miR473a, Pre鄄Peu鄄miR473a, and used floral dip method to transform miR473a into Arabidopsis
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