扩增基因全长实验技术讲解.pptVIP

RACE PCR 每50ul的体系中先合成41.5ul的Master Mix: 34.5ul PCR-Grade Water 5.0ul HiFi PCR Buffer 1.0ul dNTP 1.0ul HiFi Mix RACE PCR PCR反应体系： 5’RACE ready cDNA : 2.5ul UPM（10*）：5ul GSP1（10uM）：1ul Master Mix：41.5ul Total：50ul 扩增基因全长实验技术 获取基因全长简介 基因初步验证 基因全长获取（RACE技术） RACE产物鉴定 4 1 2 3 以介绍5’RACE技术为主 5 对序列进行生物信息学分析 目录 为什么要获取基因全长？ 什么是EST？ 获取基因全长基本流程？ 获取基因全长简介 EST (Expressed Sequence Tag)表达序列标签—是从一个随机选择的cDNA 克隆，进行5’端和3’端单一次测序挑选出来获得的短的cDNA 部分序列,代表一个完整基因的一小部分,在数据库中其长度一般从20 到7000bp 不等,平均长度为360 ±120bp 。 获取全长cDNA是研究 基因功能的关键，是 进行基因功能及产物 分析的必