植物生理学实验资料.pptVIP

* * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * 四、结果计算 呼吸强度(co2mg/kg.小时) =V*N*22 / W*T V 空白与样品滴定量差； N 标准HCl（当量）浓度 T 样品呼吸反应时间（小时） 22 co2的克当量 W 样品重kg E11吲哚乙酸氧化酶活性的测定 一、原理 IAA氧化酶是一种含铁的血红色素蛋白质，参与吲哚乙酸(植物生长素)在植物体内的氧化。 在吲哚乙酸氧化酶的作用下，吲哚乙酸受到氧化，生成无植物生理活性的3一亚甲氧基代吲哚最终产物。 以破坏吲哚乙酸的速度表示酶活性的大小，用比色法测定吲哚乙酸含量的变化。 二、材料、仪器设备及试剂 材料：绿豆 仪器设备： 研钵、试管、可见光分光光度计、 恒温水浴锅 试剂： 氯化锰、175ug/ml(1mmol/L)吲哚乙酸、磷酸 三、实验步骤 1．新鲜绿豆芽，去子叶，留胚轴待用。 2．取5g下胚轴加磷酸缓冲液5ml（预冷），研磨成匀浆，用磷酸缓冲液定容至40ml.6000*离心10分,酶液待用。 3、取2 支试管，作如下处理： （1）氯化锰1ml+二氯酚2ml+175ug/ml吲哚乙酸1ml+酶液1ml （2）氯化锰1ml+二氯酚2ml+175ug/ml吲哚乙酸1ml+磷酸1ml，于30度下恒温水浴30分钟 4.取反应液1ml+吲哚乙酸试剂A 4ml，暗处30℃下保温30min。于530nm下比色读取光密度值。 5.标准曲线的绘制：配制浓度为0、5、10、15、20、25ug/ml的吲哚乙酸溶液，按上述方法分别测量光密度值。 6.从标准曲线上查出吲哚乙酸残留量，按下列公式计算样品中酶活性： U[ug(IAA)/g鲜重.h]=(C2-C1)*10/(1/V总*V*T/60) U为样品中酶活性[ug(IAA)/g(鲜重).h] C2为反应液中吲哚乙酸残留量（ug/ml） C1为无酶反应液中吲哚乙酸残留量（ug/ml） V总为1g鲜重样品制得的酶液体积（ml） T为反应时间(min) 10为反应液体积（ml） 果蔬品质鉴定----可溶性固形物及可滴定酸含量的测定 泰国抽 绿橙 朋那脐橙 椪柑 红毛丹 番荔枝 圣女果 火龙果 人心果 菠萝蜜 榴莲 莲雾 山竹 杨桃 百香果 中国油橄榄 椰子 人参果 海南青枣 番石榴 木瓜 中国红豆杉 大雪枣 樱桃 一、实验目的： 1.固酸比是园艺学上作为果实品质或成熟度常用的参考指标之一。这里的“固”是指可溶性固形物（soluble solids）。由于糖的测定较为复杂，而果汁的可溶性固形物主要是糖，因此，在生产上通常用可溶性固形物的测定值作为糖含量的参考数据。由于果实成熟时糖含量逐渐增加而酸含量逐渐减少，所以固酸比往往随果实的成熟而逐渐增高，用固酸比可作为果实成熟的指标之一。如美国加州规定甜橙果汁的固酸比达8:1时即达到成熟。我国规定外销和内销柑橘的固酸比不能低于8:1。 果蔬的酸味来源于有机酸，这些有机酸主要贮存在液泡中。不同的果蔬所含有机酸的种类和比例不同，大多数以柠檬酸和苹果酸为主，葡萄中的主要有机酸是酒石酸。 二、实验原理及操作 2.1可滴定酸测定原理 有机酸用碱液中和，生成盐类 RCOOH + NaOH RCOONa + H2O 用酚酞作指示剂，在pH8.2时即游离酸中和的终点，无色的酚酞与碱作用生成酚酞盐，同时失去以分子水，引起醌型重排而呈红色。 2.2 可滴定酸测定试剂和器材 0.1M NaOH 标准溶液、1﹪酚酞溶液 三角瓶、碱式滴定管等 2.3 可滴定酸测定操作过程 取清洁干净样品10克，放入研钵，加入少量水研磨为匀浆，洗入250ml容量瓶，蒸馏水冲洗、定容，摇匀。过滤部分入干净烧杯，取滤液50ml加入三角瓶，加酚酞3-4滴，用0.1M NaOH 标准溶液滴定至微红色1分钟不退即终点。 2.4 计算 总酸度（﹪）= (M*V*K/W*50/250)*100 M NaOH 标准溶液的浓度 V NaOH 标准溶液的滴定用量（ml） K 酸换算系数 苹果酸为0.067、柠檬酸为0.064 、酒石酸为0.075、醋酸为0.060、乳酸为0.090 W 样品重量（克） 2.5 可溶性固形物原理 溶液浓度不同其折射率不同，二者正比例变化。 2.6 仪器与试剂 阿贝式折射仪等 2.7 操作步骤 用蒸馏水将阿贝式折射仪测定面洗净，调零；用干净滤纸或棉花搽干，滴上1-2滴待测溶液，合上；读数。 2.8 计算 读数或根据稀释倍数算出组织可溶性固形物含量，再进一步算出其固酸比。 油类种子萌发时脂肪酸含量的变