基因工程操作工具概述.pptVIP

* 我们常常说基因是生物体 组织实现生命活动的“蓝 图”，这是因为生物体可以通过基因的特异性表达，来完成各种生命活动。例如： 青霉菌能够产生出对人类有用的抗生素 ——青霉素；豆科植物的根瘤菌能够固定空气中的氮；家蚕能够吐出丝…… 那么，人们能不能通过改 造生物体的基因，定向地改变生物的遗传特性呢？比如：通过对基因进行改造和重新组合，让禾本科植物也能够 固定空气中的氮，让细菌“吐出”蚕丝，让微生物生产出 人的胰岛素、干扰素等珍贵的药物。科学家们经过多年 的努力，终于在20世纪70年代，创立了一种能够定向改 造生物的新技术——基因工程。 20世纪70年代诞生了——基因工程 基础理论和技术的发展催生了基因工程 基因工程发展的基础——生物化学、分子生物学和微生物学。 基因工程诞生的条件： 1. 20世纪中叶，基础理论的研究取得了重大突破。 DNA是遗传物质的证明——基因工程的先导。 DNA双螺旋结构和中心法则的确立——阐明了生物遗传信息 流动的方向。 遗传密码的破译——为基因的分离和合成提供了理论依据。 2.生物技术的发明使基因工程的实施成为可能 基因转移载体的发现——为基因转移找到了运载工具。 工具酶的发现——为DNA的切割、连接和功能基因的提取 创造了条件。 DNA合成和测序技术的发明——为功能基因的获得提供了 极大的方便。 DNA重组和表达的成功——表明基因工程正式问世。 第一例转基因动物的问世——标志基因工程进入迅速发展阶段。 PCR技术的发明——使基因工程得到了进一步的发展和完善。 基因工程又叫做基因拼接技术或DNA重组技术。这种技术 是在生物体外，通过对DNA分子进行人工“剪切”和“拼接”，对生物的基因进行改造和重新组合，然后导入受体细胞内进行无性繁殖，使重组基因在受体细胞内表达，产生出人类所需要的基因产物。通俗地说，就是按照人们的主观意愿，把一种生物的个别基因复制出来，加以修饰改造，然后放到另一种生物的细胞里，定向地改造生物的遗传性状。基因工程是在DNA分子水平上进行设计施工的。DNA分子的直径只有2.0nm(粗细只有头发丝的十万分之一)，其长度也是极其短小的。如流感嗜血杆菌的DNA，长度只有0.83mm，即使是较大的大肠杆菌，其长度也只有1.36mm。要在如此微小的DNA分子上进行剪切和拼接，是一项非常精细的工作，必须要有专门的工具。 基因工程是一项分子水平上施工的精细操作技术 全世界每年因虫害造成农作物产量的损失 约占总产量的13%，大数千忆美元。目前对农 业虫害的防治主要依靠化学农药，这不仅造成 严重的环境污染，损害人类健康，而且大大增 加生产的成本。 解决上述问题：你有好的办法吗？ 科学家的思路是：选择具有抗虫性状的物 种A分离出抗虫基因，然后，将抗虫基因导入 农作物体内细胞中遗传表达，使其具有抗虫性， 达到生物自身防治虫害的目的。 一个美好的愿望 我国利用基因工程培育出转基因抗虫棉获得 世界自主知识产权。首先，选择具有抗虫特性的 苏云金芽孢杆菌，并“剪取”DNA分子中的抗虫基 因——Bt毒蛋白基因；然后，让抗虫基因与一种 载体“连接”，一同“转移”到普通棉体细胞内，从 而表达出抗虫特性。 针对上述过程你有那些不明白的问题，请提 出来共同讨论。 基因工程使人们美好的愿望变成现实 目标性状——抗虫性 无抗虫性 目标物种——苏云金杆菌 受体物种——普通棉 分离出DNA分子 目的基因——Bt毒蛋白基因 基因受体——普通棉 基因共体——苏云金杆菌 目的基因与载体连接 基因重组体 受体细胞—棉细胞 转移 目的基因复制表达 普通棉表现抗虫性 转基因 抗 虫棉 转基因棉培育基本程序 剪取 连接 限制性核酸内切酶——DNA分子手术刀 来源——原核生物细胞中分离。 作用—— 切割DNA分子识别序列一定部位（切割位点）磷酸二酯键。 定义—— 把完整DNA分子切割成片段，使DNA 失去功能之酶。 1 识别作用 能够准确识别双链DNA分子中某种特定的脱氧核糖核苷酸序列 （识别序列） 2 切割作用 特点 专一性——限制酶只能断开DNA分子磷酸二酯键 而不作用氢键。 特异性——一种限制酶只能作用自己识别的双链 DNA分子序列。不同限制酶作用不同识别序列。 DNA分子限制酶识别序列的结构特点 （1）大多数限制酶的识别序列由4、6、8个脱氧 核苷酸单位组成。 （2）一般识别序列都有中心轴线，限制酶之切割 位点就在中心轴线之上或两侧。 （3）识别序列中心轴线两侧的核苷酸呈反向对称，重复排列。 常见的两种限制酶及切割位点比较 （在G与A之间切割） （在G与C之间切割）