定点突变的谷氨酰胺合成酶的表达条件和在酶法合成谷氨酰胺中的应用.pdfVIP

第 卷 第 期 化 工 学 报 ５９ ６ Ｖｏｌ．５９ Ｎｏ．６ 　 　 　 　 　　　 　　　 　　　 　　　 　　　　 　 年 月 （ ） ２００８ ６ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｉｎｄｕｓｔｒ ａｎｄ Ｅｎｉｎｅｅｒｉｎ Ｃｈｉｎａ Ｊｕｎｅ ２００８ 　 　 　 　 　 　 ｙ　 　 ｇ ｇ　 　 　　 　 檭 殐檭檭檭檭檭殐 檭 研究论文檭 定点突变的谷氨酰胺合成酶的表达条件和 殐 殐 檭 檭檭檭檭檭 在酶法合成谷氨酰胺中的应用 黄 星，刘 铭，龚 博，曾 行，张颂怡，曹竹安 　 　 　 　 （清华大学化学工程系，北京 １０００８４） 摘要：针对酶法生产谷氨酰胺中高浓度铵盐条件下的谷氨酰胺合成酶 （ ）腺苷酰化问题，从谷氨酸棒杆菌 ＧＳ 犆狅狉狀犲犫犪犮狋犲狉犻狌犿 犾狌狋犪犿犻犮狌犿 ＡＴＣＣ１４０６７调取编码 ＧＳ的基因 犾狀犃，将 ＧＳ的腺苷酰化位点Ｔｒ４０５定点突变为 狔 犵 犵 ｙ ，并在大肠杆菌中表达突变后的 ，优化产酶条件。用突变的 在摇瓶中进行酶催化过程，通过补加 Ｐｈｅ４０５ ＧＳ ＧＳ 酶催化底物谷氨酸钠和氯化铵，可以提高定点突变的 －１ 生产谷氨酰胺的能力，谷氨酰胺产量达到 · ； ＧＳ １６．８ Ｌ ｇ 在 ５Ｌ反应器规模的酶催化生产谷氨酰胺过程中，通过调控底物补加方案和反应条件，谷氨酰胺的产量达到 －１ · ，谷氨酰胺对谷氨酸的摩尔转化率为 。 ３４．２ Ｌ ９６．３％ ｇ 关键词：谷氨酰胺；酶催化；谷氨酰胺合成酶；腺苷酰化位点 中图分类号： 文献标识码： 文章编号： （ ） ＴＱ０３３ Ａ ０４３８－１１５７ ２００８ ０６－１４７９－０６ 　　　　　　 犈狓狉犲狊狊犻狅狀狅犳狊犻狋犲犱犻狉犲犮狋犲犱犿狌狋犪狀狋犾狌狋犪犿犻狀犲狊狀狋犺犲狋犪狊犲犪狀犱 狆 犵 狔 犲狀狕犿犪狋犻犮犾狌狋犪犿犻狀犲 狉狅犱狌犮狋犻狅狀 狔 犵 狆 ， ，