补肾活血固齿方成骨细胞生物活性影响的实验研究.pdf

目 录 中文摘要…………………………………………………………………………1 英文摘要………………………………………………………………………3 英文缩写………………………………………………………………………6 研究论文补肾活血固齿方对成骨细胞生物活性影响的实验研究 前言……………………………………………………………………………………………．．7 月!j舌………………………………………………………………………………………………。7 材料与方法………………………………………………………………·7 结果……………………………………………………………………………………………·14 附图……………………………………………………………………··16 附表……………………………………………………………………………25 讨论……………………………………………………………………………27 结论……………………………………………………………………………………………·31 参考文献………………………………………………………………”32 综述骨钙素在牙周炎研究中的新进展……………………………………33 致谢……………………………………………………………………………………………………43 个人简历……………………………………………………………………”44 中文摘要 补肾活血固齿方对成骨细胞生物活性影响的实验研究 摘 要 牙周炎是以牙周袋形成、袋壁炎症、牙槽骨吸收、牙齿松动为主要特 征韵口腔科常见病，是导致成年人牙齿丧失的主要原因一中药治疗牙周炎 有着悠久历史，多年来我科发现肾精亏虚型牙周炎患者的比例占绝大多 数，应用补肾活血固齿方治疗该型牙周炎患者，疗效显著，但其作用机理 不明了。根治牙周炎的关键是通过成骨细胞和破骨细胞的调节作用阻止牙 槽骨吸收或促进牙槽骨的再生。补肾活血固齿方对成骨细胞是否有作用， 机制如何，有待研究。离体成骨细胞培养技术，为药物研究提供了一种有 非胶原骨蛋白，其生理功能是保持骨的正常矿化，被认为是成骨细胞分化 的主要指标，也是骨形成或骨转换的重要标志。本研究从补肾活血固齿方 对成骨细胞增殖分化及超微结构的影响，探究中药治疗牙周炎的作用机 制，为临床应用补肾活血固齿方治疗牙周炎提供理论依据。 目的：通过在倒置显微镜下观察补肾活血固齿方对小鼠颅顶前成骨细 胞MC3T3．E1细胞形态的影响，流式细胞术检测补肾活血固齿方对 结构的影响以及125I放射免疫法检测补肾活血固齿方对OCN水平的影 响，研究补肾活血固齿方对成骨细胞增殖、分化影响，探究中药治疗牙周 炎的作用机制。 方法： 1体外培养MC3T3．E1。 2补肾活血固齿方按体表面积折算等效剂量灌胃大鼠，制备含药血清； 生理盐水灌胃大鼠，制备无药血清作为对照组，10％胎牛血清为空白对 照组。 的影响。 中文摘要 式细胞仪检测24h、48h、72h时细胞周期变化。 镜下观察此时细胞超微结构。 6用10％含药血清、无药血清、胎牛血清分别培养MC3T3．E1细胞，检 测24h、48h、72h时细胞上清液中OCN的含量。 结果： 1 补肾活血固齿方对MC3T3．E1形态无明显影响 2 含药血清对细胞的增殖无明显影响(pO．05) 3 经无药血清作用14天MC3T3．E1呈前成骨细胞样表型，细胞质内细 胞器高尔基体、线粒体、内质网不发达。MC3T3．E1经含药血清作用 14天，呈成骨细胞样表型，细胞表面突起较多，细胞质内细胞器高尔 基体、内质网和线粒体发达，具有良好的的分泌功能，细胞代谢活跃。 4 MC3T3．E1经含药血清、无药血清、胎牛血清组分别作用后，含药血 清组细胞上清液中OCN水平增加(pO．05)。并且随着作用时间的 延长，药物作用效果显示出时间依赖效应。 结论： 响。MC3T3．E1经补肾活血固齿方作用后，其超微结构呈成骨细胞样 表型。 固齿方可能通过促进成骨细胞分泌合成OCN，促进成骨细胞分化成 熟，促进骨的形成，通过促进牙槽骨的再生而发挥药物作用。