利用荧光差异显示技术分离的家蚕抗NPV相关基因s3a.pdfVIP

利用荧光差异显示技术分离的家蚕抗NPV相关基因s3a.pdf

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昆虫 学 报 , , (): !#$ %#’(’)’*+$ ,++$ !#$ %’ () * *(+ , *’% -../ (’(01%21 利用荧光差异显示技术分离的家蚕抗!# 相关基因! $ , 3 % 3 ! 3 3 3 3 徐家萍 ,陈克平 ,姚 勤 ,徐庆刚 ,刘晓勇 ,高贵田 ( 江苏大学生命科学研究院,江苏镇江 ; 安徽省农业科学研究院蚕桑研究所,合肥 ) 3 %3%3* % %*13 摘要:通过荧光差异显示技术,分析了家蚕 对 抗性品系 、感性品系 和近等基因系 添毒和 -’(./0 (’1+ K5/LM /K *1 *1//NN 未添毒处理区的基因表达的差异。根据差异显示的结果克隆了一条+% O: 长度的?P/A 片段,并用/@DBC$D# O8@B 进行了验证。 该序列经过/QK- 4.R 库的同源性比较获得了电子延伸。延伸后的序列用特异引物进行IR0LQI 扩增获得了一条+)% O: 的序 列,拼接后基因?P/A 序列全长为)%+ O:,推导的氨基酸序列与草地夜蛾,2’3’2#41$ 5 16*+2413$ .*A 同源性最高达2+ + S ;其次是 烟芽夜蛾 74)+’#8+9 :+14949 .*A,同源性为2( S ;与黑腹果蝇;1’9’28+)$ (4)$’*$9#41 .*A 同源性为+’ *S 。比较结果显示这是 一个新的家蚕基因,定名为家蚕 9*$ 基因。本实验获得的9*$ 基因在家蚕感性和抗性品系以及添毒处理和未添毒处理中都 具有差异表达,其中在抗性品系和近等基因系中的表达高于感性品系,在添毒处理中的表达高于未添毒组。因此推测它是一 个与家蚕抗K5/LM 相关的新基因。 关键词:家蚕; ;基因; ;抗性;荧光差异显示 K5/LM 9*$ 中图分类号: 文献标识码: 文章编号: ( ) T211 A (’(01%21 %’ *0*(+01 %’()*+,*-. /011*)*-.02 /0+324 2-24+0+ (1 .5* 6*-* ! $ )*2.*/ .( !# )*+0+.2-,* 0- #$%’( %$)* 7 8 , 3 % , 3 ! , 3 , 3 , 3 , 3 ( UV !760L7#; QW4/ X$0L7#; YAZ T7# UV T7#;0[6#; \-V U76@0Y@#; [AZ [70R76# 3 -#FB7BB$ @E \7E$ .?7$#?$F,!76#;F V#7J$DF7B] ,NC$#976#;,!76#;F %3%3*,QC7#6; % -#FB7BB$ @E .$D7?8BD$,A#C7 A?6G$5] @E A;D7?8BD68 .?7$#?$F, , ) W$E$7 %*13 QC7#6 : ( ) , 9:+.)2,. VF7#; E

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